环氧化物水解酶产生菌的筛选及其用于手性药物中间体合成的探讨

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手性环氧化物及其水解产物相邻二醇是医药、农药及许多天然生物活性物质合成过程中的重要中间体.该研究利用化学方法分别以苯甲醛、苯乙醛和β-苯乙醇为原料合成底物,其产物和中间体结构经红外光谱和<1>HNMR确认.以苯基环氧乙烷为底物,对采自不同地方的土样和水样,用微板光谱仪进行初筛和用HPCE、HPLC进行复筛,初筛获得有环氧化物水解酶活力的菌株400株,复筛获得对映选择性水解苯基环氧乙烷的菌株4株,并对部分菌株进行初步鉴定.进一步研究了时间、碳源、氮源、pH、底物诱导作用对产酶和生物量的影响.将3-苯基-2,3-环氧丙酸乙酯、4-苯基-2,3-环氧丙酸乙酯、芐基缩水甘浊油醚用四株菌进行生物转化8、24h取样检测,研究不同菌株的底物特异性,对用生物拆分法制备手性3-苯基-2,3-环氧丙酸乙酯、手性4-苯基-2,3-环氧丁酸乙酯进行了探讨.该课题的创新性结果主要有以下几个方面:1.筛选得到了一株选择性水解苯基环氧乙烷的菌株,所得水解产物(S)-苯基乙二醇对映体过量值约为100﹪.这是到目前为止筛选到的对该化合物对映选择性最高的菌株.2.建立了用HPLC分析手性3-苯基-2,3-环氧丙酸乙酯和4-苯基-2,3-环氧丁酸乙酸、芐基缩水甘浊油醚的分析方法.3.首次获得了对底物3-苯基-2,3-环氧丙酸乙酯和底物4-苯基-2,3-环氧丁酸乙酯有对映体选择性水解作用的菌株.
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