核糖体蛋白L13与去乙酰化酶SirT1之间的关系及其生物学功能的研究

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酵母Sir2基因编码的表达产物是一种去乙酰化酶,依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD发挥活性作用,能够显著的延长酵母寿命。哺乳动物Sirtuin家族在进化上与酵母Sir2高度同源,家族七个成员(Sirt1~Sirt7)都包含一个含有275个氨基酸组成的核心催化结构域,依赖NAD行使去乙酰化酶功能,在生物体内参与很多重要的新陈代谢的过程。Sirt1是最早被发现的,也是被研究最多的Sirtuin家族成员,他不仅仅是一个去乙酰化酶,还参与到许多信号传导途径中,更通过影响许多已报道的重要的蛋白的活性从而参与许多重要的生理活动,影响细胞代谢,长寿,细胞存活,生长,分化,衰老,凋亡,癌症等等。核糖体是生物体合成蛋白质的重要场所,存在所有的生物体中。核糖体由大小两个亚基组成,小亚基负责读取信使RNA上面的信息,而大亚基负责将募集来的氨基酸连成肽链。核糖体蛋白是核糖体重要的组成成分,与核糖体RNA一起共同组成核糖体,行使蛋白质合成的功能,近些年来核糖体蛋白又被发现有除了合成蛋白质以外的其他功能。哺乳动物核糖体由60S大亚基和40S小亚基组成,60S核糖体蛋白L13是由RPL13基因编码而成,是核糖体大亚基蛋白中的一种,属于L13E家族,又名BBC1.在这个课题中,我们创新性的发现L13是SirT1的一个新的结合蛋白,在细胞中有共同的空间定位,L13可以显著的降低SirT1的蛋白水平而不是mRNA水平,我们发现L13可以促进SirT1的泛素化。我们引入了去泛素化酶,如usp2a, usp2b, uch11, uch12。共转这些去泛素化酶能够抑制L13对SirT1的泛素化降解,我们还发现了在核糖体压力情况下L13与SirT1的结合增强,证明了在核糖体压力下L13和SirT1的相对变化。我们的工作还有很多不足之处,还需要进一步完善和改进。
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