【摘 要】
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目的：研究从我院住院患者、医院环境以及医务人员手分离的耐药革兰阴性杆菌的分布情况，耐药特征和耐药机制；医院不同对象分离的耐药细菌的同源性，探讨耐药细菌的传播机制及其与医
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目的：研究从我院住院患者、医院环境以及医务人员手分离的耐药革兰阴性杆菌的分布情况，耐药特征和耐药机制；医院不同对象分离的耐药细菌的同源性，探讨耐药细菌的传播机制及其与医院环境和医务人员手卫生的关系。
方法：收集自临床送检标本的耐药革兰阴性杆菌146株，同时在ICU病房采样收集医院环境及医护人员手部的革兰阴性杆菌，进行常规分离鉴定，K-B纸片法进行药物敏感试验；采用表型筛选法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产酶率，分别用TEM、SHV和CTX-M型引物进行PCR扩增检测基因类型；双纸片扩大及协同实验进行金属β-内酰胺酶的表型初筛，采用IMP和VIM型引物对表型阳性菌株进行PCR扩增，DNA测序并进行同源性比较确定基因类型；采用质粒指纹图谱及ERIC-PCR对从医院不同对象分离的同类型耐药革兰阴性杆菌进行同源性分析。
结果：1．146株革兰阴性杆菌中肠杆菌科细菌和非发酵细菌分别占65.1％(95／146)和34.9％(51／146)，其中39.7％(58／146)分离自各ICU病房；22株环境病原菌标本主要为不动杆菌属，占86.4％：168株革兰阴性杆菌对多种抗菌药物耐药。2. 168株革兰阴性杆菌中共检出ESBLs菌57株，总检出率为33.9％；产ESBLs菌株比非产ESBLs菌株的耐药性显著提高；PCR检测30株(52.6％)携带TEM基因，18株(31.6％)携带SHV基因，20株(35.1％)携带CTX-M基因，还存在同一菌株的多基因携带情况。3．耐头孢他啶或／和亚胺培南的非发酵革兰阴性杆菌52株，检测出7株MBL阳性株，PCR检测出一株产VIM-2型金属酶的铜绿假单胞菌。4．从临床和环境分离的肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、部分不动杆菌属经质粒指纹图谱及ERIC-PCR基因检测均存在同源性，且神经外科存在耐药阴沟肠杆菌的爆发流行。
结论：1．我院临床和ICU环境分离的革兰阴性杆菌具有明显的耐药性，大部分为多重耐药菌。2．革兰阴性杆菌中检出ESBLs阳性菌株57株(33.9％)；ESBLs阳性菌比ESBLs阴性菌对临床常用抗菌药物的耐药率差异有显著性。3.52株耐CAZ或／和IMP的非发酵菌中，检出MBL阳性菌7株(13.5％)；PCR法从其中检出一株VIM-2型金属酶基因；MBL阳性菌呈高度多重耐药。4．ICU病房中存在着多重耐药革兰阴性杆菌的交叉污染与感染流行。5.必须加强医护人员手卫生观念及病区环境的清洁与消毒，控制耐药菌侏的流行。
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