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背景与目的：肿瘤的多药耐药(Multi-Drug Resistance, MDR)是肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物出现耐受性的同时,对其他多种结构不同、作用靶位不同的抗肿瘤药物也产生耐受性的现象。肿瘤的多药耐药是导致癌症化疗失败和复发的主要原因之一。5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶核苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC, DAC),是一种去甲基化药物,临床报告显示它对血液性恶性癌变及实体瘤具有广谱抗肿瘤活性。适用于治疗骨髓增生异常综合征(简称MDS)。近年来,随着去甲基化药物在多种恶性血液病治疗中的应用,相关研究报道显示,其与肿瘤化疗药物联用时可以提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,使其在逆转肿瘤多药耐药治疗中具有广阔的应用前景。本课题研究了5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶核苷对多药耐药肿瘤治疗的作用。方法：采用MTT法检测DAC对实体肿瘤及血液系统肿瘤耐药株——人乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADR、口腔表皮癌多药耐药细胞KBV/200、人慢性粒细胞白血病多药耐药细胞株K562/ADR和人急性早幼粒多药耐药细胞株HL60/ADR的生长抑制率；用FACS法检测DAC对上述细胞周期分布变化及细胞内药物蓄积;采用RT-PCR及蛋白质印迹法检测细胞周期相关基因和蛋白的表达。结果：DAC对耐药细胞株MCF-7/ADR及KBV/200均呈现明显的生长抑制作用,细胞周期被阻滞在G2/M期,并呈时间及剂量依赖性；且结果显示,DAC对多药耐药细胞的生长抑制作用强于其对应敏感细胞。细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21wafl/cipl mRNA及蛋白的表达均上调。DAC作用后,细胞内药物蓄积增加。结论：本课题首次在肿瘤多药耐药细胞中证实了DAC的生长抑制作用。DAC可以通过诱导G2/M期阻滞,从而抑制肿瘤多药耐药细胞的增殖,其机制可能与上调p21wafl/cip1,cyclin A,cyclin E的表达有关。DAC使细胞内的药物蓄积增多,为肿瘤化疗的联合用药提供了新的理论和实验依据。背景与目的：肿瘤耐药性的产生是恶性肿瘤化疗过程中的一个棘手问题。随着miRNA研究的深入,miRNA通过调控靶基因的表达,与肿瘤细胞耐药性的产生有着密切的关系。目前的研究已经验证了miR-27a在乳腺癌、胰腺癌、胃癌及子宫内膜癌中与肿瘤耐药性产生的相关性。本课题研究了miR-27a在慢性髓原性白血病细胞中对耐药性的调控作用,并通过寻找其启动子区结合的转录因子从而发现miR-27a在亲本及耐药细胞中存在表达差异的根本原因。方法：采用Taqman探针法检测]miR-27a在K562及K562/ADR细胞中的表达；采用FACS检测K562及K562/ADR细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)的表达；利用脂质体Lipofactamine2000将miR-27a的模拟物]mimics、阻遏物inhibitors及阴性对照negative control RNA (NC)转染K562和K562/ADR细胞；Realtime-PCR技术检测转染后细胞多药耐药蛋白-1(MDR1)基因表达；FACS法检测转染后K562和K562/ADR细胞P-gp蛋白表达及细胞内罗丹明123(Rho-123)蓄积量；采用SDS-PAGE分离miR-27a启动子区结合转录因子。结果：P-gp在慢性髓原性白血病耐阿霉素细胞K562/ADR中明显高表达,在其亲本细胞K562中未检测到P-gp蛋白的表达；miR-27a在K562/ADR细胞中高表达；转染miR-27a mimics后,MDR1mRNA表达增高,P-gp表达增高,细胞内罗丹明蓄积量减少；转染miR-27a inhibitors后,MDR1mRNA表达量降低,P-gP表达下降,细胞内罗丹明蓄积量增加；SDS-PAGE电泳结果显示在K562和K562/ADR细胞中miR-27a启动子区结合的转录因子有3个存在表达量的明显差异。结论：在P-gp高表达的慢性髓原性白血病耐阿霉素细胞中,miR-27a表达异常增高,可能通过正调控MDR1/P-gp的表达和功能,降低细胞内药物的蓄积,参与慢性髓原性白血病耐阿霉素的发生。MiR-27a启动子区在K562和K562/ADR细胞中存在表达差异的转录因子可能是介导耐药发生的根本原因。