基于硼酸吸附剂的邻羟基化合物选择性分离和富集方法

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在复杂样品的分析检测中,样品的前处理是一个十分重要的步骤。如何快速、高效的从复杂成分的实际样品中对痕量的目标化合物进行分离富集,是提高分析灵敏度和准确性的关键。固相萃取(solid phase-extraction, SPE)作为一项新型的样品前处理技术,以其低污染、高效率、操作简便等优点,已在食品分析、生物医药及环境监测等领域得到广泛应用。通常使用的固相萃取吸附剂由于缺乏特异性,对复杂体系样品很难进行选择性富集。因此,研究具有高选择性的吸附剂已成为近年来分析化学领域研究的重点方向之一。本文制备了新型硼酸吸附剂,建立了硼酸柱SPE-HPLC-UV的分析方法,对顺式邻二羟基化合物进行分离富集。主要研究内容包括:1.本文以硅胶为基质,利用“点击化学”方法,将炔基化3-氨基苯硼酸键合到叠氮化硅胶上,制备了一种新型硼酸固相萃取吸附剂。通过穿透实验和固相萃取实验,证明了该吸附剂对顺式邻二羟基化合物的选择性。2.本文将硼酸吸附剂应用于多巴胺的固相萃取,建立了多巴胺的SPE-HPLC-UV分析方法。并对缓冲液、淋洗液、洗脱液进行考察,研究了其对萃取回收率的影响。结果表明,对200mg吸附剂装填的萃取柱,用甲醇、磷酸盐缓冲溶液(pH8.0)处理,再分别用1mL水和2mL20%甲醇淋洗,3mL1mol/L醋酸甲醇溶液洗脱,多巴胺的萃取回收率最高。在最优萃取条件下,多巴胺的回收率达90%以上。多巴胺分析的线性范围为0.1~100μg/mL,检出限为0.0001μg/mL,相对标准偏差(RSD)<10.6%。在实际样品分析中,大鼠空白血加标液的回收率均高于97%,相对标准偏差(RSD; n=5)为4.30%。3.将硼酸吸附剂应用于中药金银花中顺式邻二羟基成分的筛选,建立了SPE-HPLC-ESI-Q-TOF MS的方法,对其吸附性和选择性进行考察。液质联用结果表明,硼酸吸附剂可以有效的从复杂成分的中药提取液中分离出8种顺式邻二羟基化合物,分别为绿原酸、咖啡酸、5-咖啡酰奎尼酸、Secundiflorol C、芦丁一水合物、芦丁、槲皮素、木犀草素。证明了硼酸柱对中药中的顺式邻二羟基化合物有选择性富集作用。该研究为中药中邻二羟基化合物的提取提供了一种新思路。
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