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在影响人类健康的世界性问题中,肿瘤疾病已成为仅次于心血管疾病的人类健康第二号“杀手"。药物治疗是癌症治疗的三大疗法之一,目前科学家已发现了几十种有效的抗肿瘤药物,但对危害人类生命健康最严重的实体瘤的药物治疗却未能达到满意的效果,因此开发新型抗肿瘤药物依然是药物筛选的热点。FW-04-806是从一株来源于国内的土壤链霉菌FIM-04-806发酵液中提取出来的具有抗肿瘤活性的双噁唑环大环内酯化合物,经过现代有机波谱分析和x-晶体衍射实验表明其分子结构式与聚酮化合物Conglobatin相同。近年来大环内酯类抗肿瘤抗生素的开发成为肿瘤治疗药物开发的一个热点,且含噁唑环的大环内酯类抗生素表现出很强的抗肿瘤活性,因此含噁唑环大环内酯结构的FW-04-806具有一定的研究价值。同时,在初步的药理学和药代动力学中,FW-04-806表现出对多株肿瘤细胞系的增殖抑制作用和良好的药代动力学特性,引起了我们的极大关注。本研究课题首先通过对FW-04-806产生菌FIM-04-806的微生物学研究,获得工业化生产FW-04-806的菌种、发酵工艺条件和化学提取纯化路线,建立FW-04-806的检测方法和质量标准;再对FW-04-806进行抗肿瘤活性的药效学研究,主要包括抗肿瘤谱、作用靶点及其作用机制研究。具体的研究方法和结果如下:1.对FW-04-806产生菌链霉菌FIM-04-806进行微生物分子生物学和常规菌种选育相结合的研究方法,并结合进行系统的菌种发酵营养学的研究,提供工业化生产菌株;2.在摇瓶培养水平和全自动中试发酵罐上开展链霉菌FIM-04-806发酵的条件研究、代谢产物变化、菌株次级代谢产物与生产条件变化的关系,探索了适应于工业化发酵培养的合适营养配方和生产条件,优化生产工艺,提供工业化发酵生产工艺。3.建立了完善FW-04-806的提取纯化路线和质量标准,使FW-04-806的纯度达到98%以上,单个杂质控制在0.5%以内,确保了样品的质量。4.MTS法检测FW-04-806对多种肿瘤细胞的增殖抑制作用。不同浓度FW-04-806作用细胞48h后,根据MTS结果计算出FW-04-806对各肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50),得出FW-04-806的抗肿瘤谱。5.采用化学蛋白质组化研究、计算机模拟对接、Hsp90和Cdc37体外结合实验、免疫共沉淀、si RNA基因敲除及实时定量PCR等实验,对FW-04-806作用机制进行研究,结果表明FW-04-806是一个新型的Hsp90抑制剂,能够直接与Hsp90的N端结合,并且可以抑制分子伴侣Hsp90和辅分子伴侣细胞分裂周期蛋白Cdc37之间的反应。6.FW-04-806的抗肿瘤作用从分子水平和细胞水平进行检测。结果证明FW-04-806引起肿瘤细胞的G2/M期阻滞和凋亡,引起Hsp90客户蛋白的降解,并且可以使Hsp90客户蛋白的表达量随FW-04-806浓度和作用时间增大而下降。7.通过对小鼠H22、人乳腺癌SKBR3和MCF-7裸鼠移植瘤模型的抑制瘤块增殖作用评价FW-04-806的体内抗肿瘤活性。FW-04-806对肿瘤移植瘤模型均表现出良好的体内抗肿瘤作用,并且具有低毒性和较好的耐受性。综上所述,本课题研究开展了FW-04-806的微生物发酵、分离纯化、质量控制和药效学药理学研究,基本完成了对FW-04-806的成药性评价。