基于氨基磁性微球荧光免疫分析的急性心肌梗塞早期诊断

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:auroragame_luoxl
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随着生物医学和生物工程相关领域研究的发展,功能性高分子微球的制备越来越受到人们的关注,探索高分子微球的功能化以及将这些微球应用于免疫分析、药物释放、生物大分子分离、生物传感和固定化酶等方面是高分子微球的重要研究方向。在这种研究背景下,本文的研究工作主要围绕着功能磁性高分子微球的制备、表征以及初步应用展开,具体涉及四氧化三铁纳米粒子(Fe3O4)的制备及其表面改性、核-壳结构的高分子微球的制备及其用于急性心肌梗塞(AMI)早期标志蛋白—肌红蛋白(MYO)和心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的免疫分析的研究。具体来说,取得以下几方面的结果:(1)采用化学共沉淀法制备了Fe3O4粒子,并用油酸钠改性,通过傅里叶变换红外光谱仪(FITC)、透射电子显微镜(TEM)、X-射线衍射仪(XRD)和振动样品磁强计(VSM)对其进行了表征,表明制得的Fe3O4粒子粒径约8-15 nm,分散性良好,并具有超顺磁性,比饱和磁化强度为48 emu/g。(2)利用分散聚合法制备了表面带有氨基活性基团的磁性高分子微球,并通过透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、紫外/可见光分光光度计、振动样品磁强计(VSM)、原子吸收分光光度计及化学滴定法等对其进行了表征,表明制得的高分子微球具有核-壳结构,平均粒径为1.12μm,表面氨基基团含量为0.22 mmol/g,磁含量为26.24%,具有超顺磁性,比饱和磁化强度为13 emu/g,在0.42 T磁场中8 min内透光度即可达到98%以上。(3)利用超顺磁性高分子磁性微球作为抗体固定载体,采用夹心荧光免疫分析法检测AMI早期标志蛋白—MYO和H-FABP,通过激光共聚焦显微镜对实验结果进行分析,并利用荧光分光光度计测定该方法的特异性和免疫复合物微球的荧光稳定性,验证了实验结果的可靠性。
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