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目的:本课题拟通过高脂饲料和猪血清联合诱导小鼠肝纤维化模型,研究竹节参总皂苷对小鼠脂肪性肝纤维化的预防保护作用,并初步探讨其可能的作用机制。 方法:48只BABL/C小鼠随机分成四组:正常对照组,模型对照组和竹节参总皂苷低、高剂量组。除正常对照组给与普通饲料外,其余各组均给与高脂饲料造模,10g/只/d,同时竹节参总皂苷低、高剂量组分别灌胃给与100mg/kg、300mg/kg的竹节参总皂苷,1次/d,持续10W;从第5W开始,除正常对照组小鼠腹腔注射无菌水外,其余三组小鼠腹腔注射猪血清,0.1ml/只/W,在第6,7W时分别将血清稀释3倍后,以同等体积腹腔注射。末次给药并禁食12 h后,称小鼠体重并记录,处死小鼠。(1)测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆汁酸(TBA)含量;(2)分离肝脏并拍照,称取湿重计算肝脏指数,取相同部位肝组织进行HE、Masson和电镜染色,分别进行肝组织显微和超微结构形态分析;(3)取部分肝组织进行羟脯氨酸含量的检测(4)取部分肝组织,应用PCR技术对COLLIα、α-SNA、TIMP、CHOP、GRP78的mRNA表达情况进行分析;(5)另取部分肝组织,应用western blotting技术分析COLLIα、GRP78和pJNK蛋白表达情况。 结果:竹节参总皂苷能够明显降低肝纤维化小鼠血清中ALT、AST活性,TG、TBA、LDL含量,升高HDL含量(P﹤0.05);竹节参总皂苷各剂量组可以改善肝脏外观并降低肝脏重量指数;HE染色观察发现:竹节参总皂苷各剂量组可明显改善肝脏组织脂肪变性、纤维组织增生和炎性细胞浸润;Masson染色观察发现:竹节参总皂苷各剂量组能够明显抑制胶原纤维的产生;电镜观察发现:竹节参总皂苷各剂量组能明显改善内质网、线粒体形态和脂肪变性;肝脏的PCR分析发现:竹节参各剂量组可以下调COLLIα、α-SNA、TIMP、CHOP、GRP78的mRNA表达;肝脏的western blotting分析发现:竹节参各剂量组均可以降低COLLIα、GRP78和pJNK蛋白表达。 结论:竹节参总皂苷对高脂饲料和猪血清联合诱导的脂肪性肝纤维化小鼠具有明显的预防保护作用,其机制可能与抑制内质网应激反应,抑制CHOP和JNK介导的凋亡通路有关。