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[研究目的]通过甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测法对脑胶质瘤患者脑脊液中6-O-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因甲基化进行检测,同时利用免疫组化技术检测胶质瘤患者肿瘤组织中的MGMT蛋白,探讨胶质瘤患者脑脊液中MGMT基因的甲基化状态和MGMT蛋白表达在胶质瘤组织中的关系,从而寻求一种间接反映胶质瘤组织中表达MGMT蛋白的指标,为制定胶质瘤患者个体化的化疗方案提供理论依据。[研究方法]收集云南省肿瘤医院2011年3月-2012年7月术前诊断疑似恶性胶质瘤患者的脑脊液,整理记录患者的临床病理资料,筛选出术后病理确诊为恶性胶质瘤患者的脑脊液,采用DNA提取试剂盒(DNeasy(?) Blood&Tissue69504)提取脑脊液DNA在验证人基因组DNA存在后,运用MSP技术检测脑脊液DNA中MGMT基因启动子甲基化的情况。同时选用10例脑梗患者的脑脊液标本做为恶性胶质瘤患者脑脊液标本的对照组,对检测结果进行统计学相关性分析。[研究结果]1.共提取脑脊液DNA55例,其中脑胶质瘤患者组、脑梗患者组各为45例和10例。2.脑胶质瘤患者组的肿瘤组织中的MGMT蛋白甲基化阳性29例,甲基化率为64.4%。3.脑胶质瘤患者组的脑脊液MGMT基因启动子甲基化24例,甲基化率为53.3%。4.采用Spearman相关系数分析,(P<0.05)脑胶质瘤中MGMT蛋白表达与脑脊液中MGMT基因启动子甲基化呈正相关关系。5.男性脑胶质瘤患者肿瘤组织中的MGMT蛋白表达阳性率66.7%,女性患者为61.9%。6.(65年龄组脑胶质瘤患者肿瘤组织中的MGMT蛋白表达阳性率为65.4%；>65年龄组脑胶质瘤患者肿瘤组织中的MGMT蛋白表达阳性率为63.2%。7.采用χ2检验,脑胶质瘤患者肿瘤组织中的MGMT蛋白表达阳性率与性别、年龄没有相关性。8.男性脑胶质瘤患者组的脑脊液MGMT基因启动子甲基化率54.2%,女性患者为52.4%。9.<65年龄组脑胶质瘤患者组的脑脊液MGMT基因启动子甲基化率为52.6%；>65年龄组脑胶质瘤患者组的脑脊液MGMT基因启动子甲基化率为50.0%。10.采用χ2检验,脑胶质瘤患者组的脑脊液MGMT基因启动子甲基化率与性别、年龄没有相关性。11.脑梗患者组的脑脊液中未检测出MGMT基因启动子甲基化,采用Fisher精确概率计算,与脑胶质瘤患者组的脑脊液MGMT基因启动子甲基化有显著差异。[结论]1.运用试剂盒法(DNeasy(?) Blood&Tissue69504)提取纯化脑脊液DNA可靠性高。2.用MSP法检测脑脊液中MGMT基因启动子甲基化有可能成为早期检测恶性胶质瘤患者的一种微创方法,其敏感性、特异性有待大样本临床病例的进一步研究。3.MSP法检测脑脊液中MGMT基因启动子甲基化有望成为脑胶质瘤微创诊断或高风险人群筛查的一个新途径。为制定胶质瘤患者个体化的化疗方案提供理论依据。4.脑胶质瘤中MGMT蛋白表达与脑脊液中MGMT基因启动子甲基化呈正相关关系。5.脑胶质瘤患者组的肿瘤组织中的MGMT蛋白甲基化表达与性别、年龄没有相关性。6.脑胶质瘤患者组的脑脊液MGMT基因启动子甲基化状态与性别、年龄没有相关性。