可生物降解聚合物载体微球口服防龋疫苗的研究

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目的:龋病(dental caries)是在以细菌为主的多因素影响下,牙齿硬组织发生慢性进行性破坏的一种疾病.变形链球菌是主要致龋菌之一.变形链球菌定殖至牙表面包括起始的非蔗糖依赖性粘附和随后的蔗糖依赖性粘附.表面蛋白(Protein Antigen of Streptococcus mutans serotype c,PAc)、葡糖基转移酶(glucosyltransferaes,GTF)在这两个过程中起到关键的作用,是变形链球菌的主要致龋毒力因子,可作为候选疫苗抗原用于龋病的免疫防治中.粘膜免疫能诱导局部长期的免疫记忆,产生SIgA抗体和全身免疫应答.口服免疫是粘膜免疫中最方便实用的免疫途径.该研究选择PAc、PAc多肽(301~319)和GTF多肽(HDS,552~570)作为抗原,运用可生物降解聚合物PBLG-PEG-PBLG(聚谷氨酸苄酯-聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯)三嵌段共聚物做载体,保护抗原、增强疫苗的免疫应答,制备的防龋微球疫苗免疫SD大鼠,观察口服免疫后的抗体产生情况及防龋效果.结论:l、选择PAc分子中的301-319氨基酸序列和GTF分子中的552-570氨基酸序列作为肽段,以及PAc全段三种抗原用PBLG-PEG-PBLG作载体,分别制备了微球防龋疫苗.2、用紫外光分光光度计,测定蛋白含量来检测微球的包封率发现,超声时间30秒,PVA浓度在4%时,包封率最高,该实验测得包封率为20-30%.3、ELISA实验检测发现微球防龋疫苗具有免疫原性,能刺激机体产生免疫应答,各口服微球疫苗组均能在大鼠血清中产生IgG抗体、在唾液中产生IgA抗体.4、PAc、PAc多肽及多肽HDS微球疫苗能减少龋模型大鼠龋齿的发生,以光滑面龋的减少更显著.
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