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HAB-6菌株是本实验室从豇豆中筛选分离出来的一株有抑菌活性的生防菌。本文对HAB-6菌株的分类地位、抑菌广谱性、脂肽类抗生素相关基因、抑菌活性粗提物质的抑菌作用、机理及促生作用进行了初步研究。1、通过形态学观察、革兰氏染色法、鞭毛染色、扫描电镜观察,HAB-6菌株为革兰氏阳性细菌,菌落呈乳白色周围有褶皱,菌体形态为杆状,两端钝圆,周生稀疏鞭毛,结合16S rDNA序列分析和特异性序列分析,鉴定HAB-6菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。2、通过平板对峙法发现HAB-6菌株对橡胶树炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioiides)、芒果炭疽病菌(ColletotrichumgloeosporioiddesPenz.)、香蕉枯萎病菌(Fusacium oxysporum f.sp.ubense)等17株植物病原真菌均具有较强的抑菌活性,抑制率为 45.48-72.20%,其中对脐橙炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)抑菌率最高,达72.20%。通过有机溶剂(正丁醇)萃取法、硫酸铵沉淀法、酸沉淀法提取HAB-6菌株发酵上清液,发现抑菌活性物质存在于正丁醇提取物中。稳定性实验研究表明:正丁醇粗提物经紫外线照射120 min后,抑菌活性为对照的78%,表明紫外线对HAB-6菌株具有一定的影响,而经100℃处理后抑菌活性仍为对照的91%,表明HAB-6菌株的活性物质具有较好的热稳定性;在pH=2,3,4,12时,抑菌活性减弱,表明HAB-6菌株的活性物质不耐强酸强碱,其适宜的pH为5.0～9.0。3、通过对峙培养发现,酸沉淀法提取的脂肽类物质没有抑制病原真菌的活性。通过高效液相色谱LC-MS对酸沉淀法提取的脂肽类物质分析,结果表明脂肽类粗提物中含有 C14Iturin A、C16 IturinA、C17Iturin A/C17Mycosubtilin、C13Surfactin A、C1sSurfactin C,通过PCR扩增合成脂肽类物质的10条基因和合成脂肽类物质的关键酶基因,可以得到ituC基因、srfAB基因、ituD基因、fenD基因、yndj基因5条合成脂肽类物质的基因和ituA基因、ituD基因、lpa-14基因、sfp基因、mycB基因、fenB基因5条合成脂肽类物质关键酶的基因。4、芒果果实和芒果离体叶片试验表明,正丁醇提取物能有效抑制病原菌对果实和叶片的侵染。显微结构观察,喷洒正丁醇提取物处理后的芒果炭疽病菌菌丝扭曲、膨大、畸形。正丁醇提取物对橡胶树白粉病具有防效,对番茄早疫病菌有一定的防效。不同浓度正丁醇提取物对铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)溶藻率为57.14%、73.47%、85.71%,EC50,7d=0.90 mg/L。5、HAB-6菌株正丁醇提取物还可以诱导烟草防卫反应,产生抗性防卫烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的侵染。在TMV侵染72h时,涂抹正丁醇提取物的处理组过敏性反应标志基因hsr203的表达量为对照的186.9倍,达到最高值,随后逐渐下降。48 h时,植物系统抗性相关基因PRl-b基因表达量显著增加至4.40倍,并且持续保持高表达量。NPR1基因在72 h时达到最高值为对照50.56倍,且维持着高表达量。正丁醇提取物可诱导烟草系统抗性相关基因表达量增高。正丁醇提取物能促进烟草生长,通过qRT-PCR分析植物细胞扩张蛋白基因NtEXP2被诱导表达量增加。6、用不同浓度正丁醇提取物处理番茄种子,稀释1500倍的正丁醇提取物对番茄种子促生效果在0.05水平上差异显著。用稀释1500倍的正丁醇提取物喷洒番茄幼苗,30 d后,叶片数比对照组增加8.33%,干鲜比对照组升高6.89%,根长比对照组增加23.66%,叶绿素含量比对照组升高21.97%,均在在0.05水平上呈显著差异。将正丁醇提取物应用于田间,豇豆茎长比对照提高31.92%,重量提高37.16%。7、斑马鱼毒性试验,96hpf时正丁醇提取物急性致死浓度LC50=17.785mg/L,属于低毒,当浓度大于15.81 mg/L,处理至96 hpf时能导致斑马鱼卵黄囊肿。8、对正丁醇提取物进一步用减压抽柱法,硅胶柱层析,凝胶柱层析,反向柱层析分离得到单体化合物H6,通过质谱、核磁共振分析,该化合物为1-(3-amino-3,4-dihydronaphthalen-2-yl)ethanone,根据比对数据库,分离得到的化合物H6为聚酮类化合物,是一种新化合物。