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目的：通过构建人低分化鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,从细胞水平和分子水平两方面探讨拓扑替康(TPT)时辰放射增敏的作用机制。方法：240只BALB/c (nu/nu)裸鼠在统一光照条件下同步化饲养,建立统一的生物节律至少3周。随后,在裸鼠大腿外侧皮下接种人低分化鼻咽癌细胞(CNE2),建立裸鼠鼻咽癌移植瘤模型。成瘤并达到入组标准后,按照随机分组的原则,将达标的裸鼠随机分为4组：空白对照组、TPT治疗组(单化组)、RT组(单放组)、TPT+RT组,每组48只。观察四个时辰亚组3HAL0(光照后小时,hours after light onset)、9HAL0、15HAL0、21HALO治疗后的情况。其中,拓扑替康给药采用单次腹腔注射给药法,10mg/kg,在各时辰点前30分钟给入；RT组、TPT+RT组在4个时辰点分别进行单次放疗,剂量为18Gy；空白对照组在移植瘤达标后不给予任何治疗。时辰放疗结束后1小时处死各组的一半裸鼠,剩余裸鼠观察生长曲线,并测定肿瘤再生长延缓时间(TGD)。按要求获取肿瘤标本后,一部分采用免疫组化法检测各组肿瘤标本中HP-1、γ-H2AX的表达,用免疫组化图像分析软件进行半定量分析；一部分用DNA琼脂糖凝胶电泳法检测拓扑异构酶Ⅰ的表达；一部分采用流式细胞技术检测细胞周期DNA含量及凋亡率。本实验采用完全随机单因素方差分析法(ANOVA法)对各组的检测结果进行统计学分析；并采用q检验进行组间两两比较,检验其差异性。结果：1.各处理因素均对鼻咽癌移植瘤产生不同程度的抑制作用。通过鼻咽癌移植瘤的时辰放射增敏的整体动物试验,发现：相同时辰点治疗时,以TPT+RT组对肿瘤的对肿瘤的抑制效果最好。不同时辰亚组治疗时,在放射增敏组疗效有较明显差异,15HAL0>21HAL0>9HAL0>3HAL0,以15HAL0整体疗效最好。2.免疫组化检查结果显示：在对照组中,HP-1的表达呈15HAL0<21HAL0<9HAL0<3HAL0,3HAL0与15HAL0时辰亚组比较有统计学的差异,提示鼻咽癌组织中乏氧状况具有时间节律性,肿瘤组织乏氧状况为3HAL0最明显,15HAL0较低。同一时辰亚组,TPT+RT组、RT组与对照组之间HP-1及γ-H2AX的表达差异均有统计学意义(P<0.01)。不同时辰亚组,在TPT+RT组和RT组相同组别中HP-1的表达：3HAL0>9HAL0>21HAL0>15HAL0,而γ-H2AX的表达：15HAL0>21HAL0>9HAL0>3HAL0,两者在15HAL0与3HAL0的表达水平比较均有显著性差异(P<0.01)。3. DNA琼脂糖凝胶电泳法检测DNA拓扑异构酶Ⅰ的表达,呈15HAL0>21HAL0>9HAL0>3HAL0趋势,15HAL0与3HAL0组间比较有统计学意义。4.流式细胞技术检测细胞周期含量及凋亡率,各处理组与对照组比较,S期细胞比例下降和凋亡指数增加,与对照组比较有统计学意义。结论：本实验证实了拓扑替康对鼻咽癌移植瘤具有时辰放射增敏作用,对肿瘤的时辰放射增敏作用呈现昼夜节律性,以15HAL0的TPT+RT组对肿瘤的治疗效果最好。探讨拓扑替康时辰放射增敏的机制,可能与肿瘤乏氧的时间节律性,细胞周期的改变及凋亡,DNA双链的损伤,拓扑异构酶Ⅰ的表达变化等相关。