生化调控因子对施氏假单胞菌N2开环裂解苯酚的作用研究

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苯酚及其它酚类化合物是重要的工业原料,被广泛用于炼焦、造纸、染料、农药、酚醛树脂和石油化工等,因而,酚类化合物是环境中常见的一类毒性很大的污染物。微生物降解酚类污染是经济有效的途径,虽然已经分离出许多降解苯酚的菌株,但苯酚的矿化无害化始终未被解决。因此,研究高效菌株矿化苯酚的条件对于酚类污染物的净化具有现实意义。本论文以前期研究结果为基础,从共代谢碳源和供氧方式两个角度,研究一株耐高浓度苯酚的施氏假单胞菌N2,对苯酚矿化无害化的特性。研究获得以下结论:(1)甲醇、乙醇和丙酮均能作为共代谢碳源加速N2菌开环裂解苯酚,其中乙醇更有利于N2菌代谢苯酚时以邻/间位开环裂解途径进行。当苯酚为唯一碳源,代谢产物仅为邻苯二酚、对羟基苯甲酸等未开环产物;而以苯酚+乙醇为碳源时,中间物则增加了顺,顺-己二烯二酸、2-HMS、2-羟基-2,4-己二烯二酸等开环产物。(2)乙醇和苯酚共存时,施氏假单胞菌N2在曝气头静置充氧、好氧摇床振荡、非充氧摇床振荡等三种条件下,生长液中溶解氧的量分别约在6.5-7.2、4.5-6.6和2-4.6mg·L-1范围,N2菌细胞中同时存在邻苯二酚1,2-双加氧酶和邻苯二酚2,3-双加氧酶。好氧摇床振荡和非充氧摇床振荡条件下,生长11h N2菌细胞中邻苯二酚1,2-双加氧酶的酶活性分别为0.136、0.116μmol﹒mg(protein)-1﹒min-1,而邻苯二酚2,3-双加氧酶的酶活性则分别为39.57、23.05μmol﹒mg(protein)-1﹒min-1。氧气越充足,生长的N2菌细胞内两种酶的酶活性则越高。(3)在曝气头静置充氧、好氧摇床振荡、非充氧摇床振荡等三种条件下,施氏假单胞菌N2代谢苯酚过程中的TOC均呈快速下降趋势。曝气头静置充氧条件下,降解72h时有60.89%的苯酚已被矿化。外加乙醇和增加反应体系中的氧气量均有利于实现N2菌对苯酚的矿化和无害化。本文研究结果为施氏假单胞菌N2在复杂环境中的应用奠定了基础。
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