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虎眼万年青(Ornithogalum thyrsoides)为百合科(Liliaceae)虎眼万年青属(Ornithogalum)多年生草本植物,原产于非洲南部,在我国北方多地有种植和栽培,皂苷类化合物是最主要的化学成分,也是其抗肿瘤活性的主要药效物质基础。虎眼万年青总皂苷药效显著,通过多靶点、多通道用于治疗肝癌、乳腺癌、白血病等研究已经取得一定的成果,且毒副作用小,继续扩大抗癌谱研究,可有效促进其药用价值的开发与利用。肺癌是我国发病率和死亡率居前五位的肿瘤之一,在男性患者中居首位,虽虎眼万年青对癌症研究较多,但对肺癌效应研究不多,有研究发现OSW-1体外对非小细胞肺癌A549细胞IC50很低,预示有很好抗肺癌作用,但未继续深入研究,且OSW-1无法大规模合成,也就限制了其抗癌应用研究和对肺癌机理的研究。有关虎眼万年青总皂苷对肺癌作用尚未见有研究报道,本研究以非洲南部的安哥拉国丰富的虎眼万年青属O.thyrsoides资源为原料,在国内首次从原产地、原种植物中分离提取得总皂苷,以非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,考察其体内、体外抗肿瘤活性,初步探明其作用机制,并对总皂苷安全性作出评价。1.采用80%乙醇加热回流提取、石油醚萃取、水相部以D-101大孔吸附柱分离获得总皂苷,最终产品得率为1.02%。采用香草醛-高氯酸显色和紫外分光光度法测定总皂苷含量为37.0%。本方法较采用类同工艺从国内引种植物中提取总皂苷的得率(0.91%)高,表明安哥拉原种虎眼万年青植物O.thyroides中总皂苷含量较高。2.利用MTT法筛选抗肿瘤细胞,发现虎眼万年青总皂苷对非小细胞肺癌细胞株(A549)、人胃癌细胞株(BGC-823)、人结肠癌细胞株(HT-29)和人肝癌细胞株(HepG-2)4种肿瘤细胞均具有较强的抑制活性,其中对A549细胞的抑制增殖活性最强,呈一定的量效关系与时效关系,在7.81～125μg/mL药物浓度范围内呈较好的线性相关,最高抑制率达到91.6%,作用时间以48h为佳,IC50为 22.28μg/mL。3.以非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,考察虎眼万年青总皂苷体外抗肿瘤作用。随着给药浓度从15.6μg/mL至125.0μg/mL,A549细胞产生数目减少,胞质回缩、折光性增强、细胞体积缩小等形态学改变;Hoechst荧光染色法观察细胞核形态,发现细胞核染色质出现高度固缩凝集、边缘化,呈典型的凋亡细胞形态特征;流式细胞仪检测到细胞凋亡率也随之增高,由15.53%增大至71.05%,细胞Go/G1期和G2/M期DNA含量降低,S期DNA含量明显增加,细胞周期阻滞在S期。结果表明总皂苷可抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,从而有效控制肿瘤的发展。4.小鼠体内移植性非小细胞肺癌A549瘤株,考察虎眼万年青总皂苷体内抗肿瘤作用,结果各剂量组(2.4mg/kg、1.2mg/kg、0.6mg/kg,分别为1/10、1/20和1/40 LD50)抑瘤率均>30%,最高51.61%,可达到抗肿瘤植物药物抑瘤有效的认可标准,剂量以1.2 mg.kg-1为佳;各脏器指数和免疫血细胞,包括脾脏指数、胸腺指数、LYM计数与百分率、MON计数与百分率、中性分叶百分率均未见明显差异;血细胞指标中HB、WBC和PLT计数升高。结果表明总皂苷对体内A549细胞瘤体内具有直接抑制作用,对免疫器官没有明显的抑制影响,不会产生抗肿瘤药物常见的免疫抑制不良反应。5.采用小鼠腹腔注射急性毒性观察,对虎眼万年青总皂苷安全性作出初步评价,Bliss法测定半数致死量LD50值,结果LD50=23.808mg/kg,动物死亡的时间多在8h～48h内,以脏器散在充血表现为主。首次利用原产地原种虎眼万年青植物资源,扩大总皂苷抗肿瘤谱研究,结果表明总皂苷在体内、体外均对非小细胞肺癌A549细胞具有抑制肿瘤作用,且安全性高,副作用小,对免疫器官没有明显的抑制影响,不会产生抗肿瘤药物的不良反应,为虎眼万年青总皂苷治疗肺癌及抗癌新药研发以及后续药效与毒理研究提供一定的理论与实验依据。