风疹病毒流行毒株的分离鉴定及其E1区基因的序列分析

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风疹病毒(Rubella virus,RV)是能引起新生儿先天缺陷的病毒之一,属于披膜病毒科风疹病毒属。人是唯一感染宿主。人群对风疹病毒普遍易感。病毒经呼吸道传播,引起儿童或成人的风疹。最大危害是孕妇在妊娠头4个月内感染风疹病毒易发生垂直感染,导致胎儿畸形或先天性风疹综合征(Congenitialrubella syndrome,CRS)。 为了探讨我国流行株和疫苗株(BRD Ⅱ)与世界流行株和疫苗株之间的关系,本实验通过逆转录巢式PCR技术检测了61例高发人群的血液标本,结果有7例为风疹病毒RNA阳性。利用细胞培养技术对7例RNA阳性标本进行病毒分离鉴定,结果获得了一株病毒。通过细胞病变、血凝试验、电镜观察及PCR扩增、序列分析等一系列指标证实为风疹病毒,命名为HRB分离株。本实验还对分离株HRB的E1基因部分片段进行了序列分析并与其它型别基因进行比较,结果显示:此分离株与中国疫苗株(BRD Ⅱ)及另外两株香港分离株均不在同一分支,而是位于由60年代分离株所构成的一个亚支上。其原因一方面可能是由于我国现今尚未实行计划免疫,对流行株未形成选择性压力,另一方面也可能是由于RV自身的核苷酸又有很大保守性,致使我们分离株HRB在种系进化上仍停留在60年代分离株中。本实验获得的病毒分离株可为进一步研制对流行株更有免疫效果的疫苗提供实验基础。
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