随着生活水平的提高,消费者对于猪肉品质的需求也不断地提高,美味、有机的猪肉更受消费者的欢迎。因此,在保证合理的瘦肉率条件下,研究适当提高IMF含量是今后猪品种选育的方向。但是,目前我们对猪IMF的沉积的机理了解的非常有限,无法指导猪的选育。因此,研究肌内脂肪沉积的机制不但具有其重要的生物学价值,也有其重要的应用价值。肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是TGF-β超级家族成员之一,广泛存在于哺乳动物中,不同物种间其氨基酸序列具有高的保守性。在多个物种中,该基因自然的遗传缺失或突变均会导致骨骼肌质量的显著增加;MSTN基因敲除小鼠的骨骼肌质量约是野生型小鼠的两倍,故MSTN其对肌肉的生长具有抑制作用。硬脂酰辅酶A去饱和酶5(Stearoyl-CoA desaturase,SCD5)是催化合成饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的关键限速酶,对脂肪酸代谢起着重要作用。本课题组前期数据显示,SCD5可能处于MSTN基因调控肌肉生长的下游。因此,阐述MSTN与SCD5之间的相互作用关系对研究肌肉生长和肌肉间脂肪沉积具有重要意义。本研究通过在猪PK15细胞过表达和下调MSTN和SCD5的表达水平研究MSTN和SCD5间相互作用关系,以及它们在脂肪酸合成过程中的作用。本实验采用PCR方法分别克隆了猪的MSTN、SCD5基因,在对它们序列分析后分别将它们克隆到过表达载体p3×FLAG-CMV,获得过表达p3×FLAG-CMV-MSTN和p3×FLAG-CMV-SCD5。我们采用RNA干扰(RNAi)方法下调MSTN和SCD5基因表达水平。针对猪MSTN、SCD5基因序列,针对三个不同的干扰位点,设计并合成三条特异性干扰序列和相对应的非特异性序列作为对照,最后通过western blot方法各筛选出一条有效的干扰序列用于本研究。结果表明MSTN在细胞内含量的变化会引起SCD5含量的变化,进而影响甘油三脂含量的变化。这一结果显示MSTN和SCD5将存在一种直接或间接的互作关系调节甘油三脂的合成,这一结果不但为阐述肌间脂肪沉积的机制提供了分子基础,也为猪品种选育提供了分子标记基因,加快猪的育种工作。