牡丹是芍药科芍药属植物,又名富贵花、木芍药、百两金等。原产于我国,它是富贵、繁荣的象征,有着“国色天香”、“花中之王”之美称。近年来,学者们都将组织培养技术应用到牡丹快繁研究中,并为此作出了大量的研究报道。但到目前,国内还主要研究组培、栽培及繁殖技术等方面;国外则多是关于组织培养、生理因素、内含物等的研究。利用试管嫁接的技术,是改良品种的方法之一,但目前尚未见关于牡丹试管嫁接技术的研究报道。本试验所用砧木以牡丹品种“凤丹白”种子诱导出的根为供试材料,接穗选用多个品种的牡丹芽子为供试材料来建立无菌体系,并从采用不同的嫁接方法、在不同的条件下培养、选用不同长度的砧木、接穗等方面,对牡丹试管嫁接体系的建立进行相关研究,主要研究结果如下:接穗的培养中,适宜诱导不定芽的配方为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,适宜芽培养的配方为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L,适宜的光照时数为16 h/d。砧木的培养中,适宜胚生长的培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+IBA1.0 mg/L;分化愈伤的最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D0.5 mg/L+GA31.0;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L;根扩粗的最佳培养基为1/2MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA1.0 mg/L。试验采用两种方法进行嫁接:劈接法和顶接法。发现采用劈接法,嫁接苗成活率为73.33%,顶法仅为34.33%。所以,本试验认为牡丹适宜采用劈接法。用含有不同浓度IBA、6-BA、NAA的培养基对嫁接苗进行培养,结果表明:培养基中6-BA的加入有利于嫁接苗的成活。将嫁接苗暗培养0 d、5 d、10 d、15 d,可以发现:暗培养时间最长15 d时,嫁接苗为0%成活率,而暗培养0 d、5 d的均有比较高的成活率。暗培养5 d时,接穗伸长或有新叶露出,而0 d培养,需要15 d左右才有生长迹象。因此,为促进嫁接苗生长,需先进行5 d的暗培养。在一定范围内,试管嫁接苗的成活率与蔗糖浓度成正相关,过高的蔗糖浓度则会抑制嫁接苗的成活。当浓度为30 g/L时,试管嫁接的成活率最高,为73.33%;为40 g/L时,成活率下降为56.67%。结果表明,培养基中蔗糖浓度为30 g/L适宜嫁接苗生长。分别在20℃、23℃、26℃、29℃条件下进行培养,结果表明:23℃为适宜的培养温度,成活率达到73.33%。琼脂浓度低,培养基较软,不易凝固;相反则硬度过大。本试验中,当琼脂的浓度为0 g/L和3.5 g/L时,嫁接苗均出现不同程度的褐化,表现为生长不正常;当其浓度为7.0 g/L时,嫁接苗成活率最高为73.33%,且生长状态正常。嫁接时使用不同长度的砧木与接穗,成活率差异显著。试验结果得出:砧木适宜长度为1.5 cm,接穗适宜长度为1.0 cm。对牡丹嫁接体进行了愈伤组织的愈合状态观察,能明显观测到切口处砧穗愈伤组织的粘连。现有牡丹品种较少,更新较慢,难以满足市场需求。本试验利用组织培养技术,培养出适宜嫁接的砧木和接穗,进而培养出嫁接苗,以期为实现牡丹快速繁殖、试管嫁接技术研究及新品种的培育提供理论依据。