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目的：动态检测细胞趋化因子，激活正常T细胞表达和分泌的调节物(RANTES)和酸性富含胱氨酸分泌型蛋白(SPARC)在异体角膜移植排斥反应中的表达，为角膜移植排斥反应的早期诊断提供依据。 方法：首先建立实验大鼠异体角膜移植动物模型，并设同体角膜移植、角膜碱烧伤模型为对照组，在不同时间段提取各组角膜上皮细胞总RNA。用RATENS、SPARC基因引物进行RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)扩增，经琼脂糖凝胶电泳后，采用激光密度扫描半定量RANTES和SPARC mRNA的表达水平。然后对PCR扩增结果中主要条带用限制性内切酶酶切分析，验证表达结果。在取角膜上皮之前，对受试动物进行裂隙灯、活体共聚焦显微镜检查，最后角膜病理，来判断角膜排斥与否和程度。 结果：1．正常角膜上皮细胞未见RANTES基因表达，可见SPARC基因的低表达；2．异体角膜移植3天后各时间点均见排斥眼RANTES基因的高表达，同体角膜移植及角膜碱烧伤后未见表达；3．SPARC在角膜移植及碱烧伤后均见较高水平表达，且与正常细胞表达有显著差异。4．在排斥反应大鼠角膜，RT-PCR所检测基因表达结果与活体共聚焦显微镜观察及角膜病理结果呈同步趋势；5．用RT-PCR方法检测基因变化诊断排斥反应早于裂隙灯或共聚焦显微镜检查。 结论：大鼠角膜上皮RANTES mRNA表达上调与角膜移植排斥反应特异性相关。同时，SPARC在角膜移植排斥反应、角膜碱烧伤和角膜创伤过程中具有高水平表达。依照时间顺序，RANTES和SPARC早期高表达早于裂隙灯观察到的移植排斥反应一周。由此，选择性对细胞因子mRNA扩增，是早期诊断角膜移植排斥反应的有效方法。