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目的:利用普通PCR及荧光定量PCR技术对神经型布氏杆菌病患者脑脊液中布氏杆菌表面蛋白(Brucella cell surface protein,BCSP31)进行扩增,探讨BCSP31对神经型布氏杆菌病的诊断意义及其诊断敏感性。并且通过与神经梅毒、结核性、细菌性中枢神经系统感染患者脑脊液中BCSP31的表达及表达量进行对比,明确脑脊液中BCSP31对神经型布氏杆菌的特异性。 方法:收集2015年10月-2018年1月在内蒙古医科大学附属医院、内蒙古自治区人民医院、内蒙古国际蒙医医院就诊的疑似中枢神经系统感染患者40例。患者入院后完善血液学、脑影像学检查及腰椎穿刺术。确诊中枢神经系统感染性疾病者,根据影像学表现、血液学检测及脑脊液检验确诊感染类型。其中诊断神经型布氏杆菌病患者纳入观察组,其他三种神经系统感染(神经梅毒、结核性中枢神经系统感染及细菌性中枢神经系统感染)患者纳入对照组。40例患者进行腰椎穿刺术留取脑脊液,脑脊液样本送实验室进行普通PCR分析以检测BCSP31在患者脑脊液中是否有表达。其中10例诊断神经型布氏杆菌病患者、5例确诊结核性中枢神经系统感染及5例明确病原菌的细菌性中枢神经系统感染患者脑脊液进行荧光定量PCR,进一步对BCSP31在脑脊液中的表达进行相对定量分析。 结果:10例神经型布氏杆菌病患者脑脊液经PCR扩增后BCSP31均有表达,30例其他类型中枢神经系统感染患者脑脊液中BCSP31表达结果均为阴性。对阳性样本的PCR产物进行测序,结果脑脊液所含BCSP31-CX(190bp)基因片段与基因库提供的BCSP31(1817bp)核苷酸序列比较,同源性为100%。经荧光定量PCR扩增后,10个阳性样品的BCSP31mRNA表达量均在0.4-1.6之间表达,而5例确诊结核性中枢神经系统感染及5例明确病原菌的细菌性中枢神经系统感染患者脑脊液阴性样品的表达量均为0。10例神经型布氏杆菌病患者脑脊液BCSP31PCR扩增均有阳性表达,2例患者脑脊液细菌培养阳性,3例患者脑脊液凝集试验阳性,利用脑脊液PCR扩增检出布氏杆菌阳性率明显高于菌培养及凝集试验。 结论:布氏杆菌表面蛋白BCSP31在神经型布氏杆菌病患者脑脊液中表达,其对神经型布氏杆菌病具有临床诊断意义,且该蛋白对神经型布氏杆菌具有高度特异性。