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野菊花为菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L.)的干燥头状花序,具有清热解毒,泻火平肝的功效。野菊的主要化学成分包括黄酮类、酚酸类、萜类和挥发油等。具有抗炎抗菌、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤和保肝等多种药理作用。近年来,随着野菊花资源的开发与利用,市场上对野菊花原料药材的需求量日益增大。野菊花为典型的短日照植物,其秋天开花的生物学特性,逐渐不能满足人们对其产品的周年需求。近年来,学者们研究了多种调控植物开花相关的途径,逐渐探明了与植物开花相关的基因网络,在研究植物开花的光周期途径中,发现CO是模式植物拟南芥光周期途径的关键基因。因此,本研究基于野菊转录组测序分析,模拟野菊成花所需要的短日照环境,探究短日照处理对野菊光周期途径中关键基因CO的表达量及其蒙花苷积累的影响。主要研究结果如下:(1)利用华大基因公司的BGISEQ-500平台进行野菊转录组测序。共测得6.66 Gb数据。组装并去冗余后得到54112个Unigene,总长度、平均长度、N50以及GC含量分别为41592321 bp、768 bp、1170 bp和40.60%。将得到的Unigene与七大功能数据库分别比对,并进行功能注释,最终分别有38001(NR:70.23%)、24859(NT:45.94%)、23827(SwissProt:44.03%)、28556(KOG:52.77%)、27437(KEGG:50.70%)、12082(GO:22.33%)以及 31601(InterPro:58.40%)个 Unigene 获得功能注释。使用Transdecoder检测出31059个CDS。同时还检测出5181个SSR分布于4563个Unigene中,以及预测出1393个编码转录因子的Unigene。(2)采用RT-PCR法克隆得到野菊CO基因的CDS序列,并对其进行了生物信息学分析。结果显示野菊CO基因开放阅读框长1380 bp,编码459个氨基酸,该蛋白的分子量约为52.04 kDa,含有1个B-BOX结构域和1个CCT结构域,理论等电点为4.81,α螺旋占17.65%,随机卷曲占76.69%,延伸链占5.66%,无β折叠,无信号肽。系统进化树分析结果显示野菊CO与甘菊、黄花蒿同源性较高,表现为CO在同科内较为保守。为研究短日照处理对野菊光周期关键基因CO表达量的影响,使用Real-Time PCR法检测野菊不同部位及短日照处理不同天数CO的相对表达量。结果显示CO在野菊叶中的表达量最高并与其他生长部位呈现显著差异,CO在野菊不同生长部位表达量从高到低依次是:叶,茎,花蕾,花,根。对照组和处理组野菊CO基因的表达量在短日照处理不同时期下均有显著差异,其中处理组在短日照处理后18 d内CO的表达量显著低于对照组,但从22 d后开始显著上调并高于对照组,在第26 d时基因表达量上调最大。为探究短日照处理对野菊活性成分积累的影响,对野菊进行一个月的短日照处理,并使用高效液相测定了收获期野菊的蒙花苷含量。结果表明对照组和处理组野菊蒙花苷含量均达到药典规定的野菊蒙花苷含量标准,处理组野菊蒙花苷含量为24.21 mg.g-1,比对照组低4.27mg.g-1,表明短日照处理会造成野菊花中蒙花苷含量的降低。