【摘 要】
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目的循环肿瘤细胞(CTCs)的检测与回收对于肿瘤患者早期诊断、疗效的监测及预后的判断等方面有着重要的临床价值,但目前CTCs的临床检测面临着成本高、耗时长、灵敏度低且选择性较差等问题,因此迫切地需要开发新型的方法用于CTCs的检测,以满足临床的需要。本项目针对上述问题,构建一种基于纳米材料的新型电化学传感器用于CTCs的检测及收集。方法将超导电纳米碳材料科琴黑(Ketjen black,KB)应用
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目的循环肿瘤细胞(CTCs)的检测与回收对于肿瘤患者早期诊断、疗效的监测及预后的判断等方面有着重要的临床价值,但目前CTCs的临床检测面临着成本高、耗时长、灵敏度低且选择性较差等问题,因此迫切地需要开发新型的方法用于CTCs的检测,以满足临床的需要。本项目针对上述问题,构建一种基于纳米材料的新型电化学传感器用于CTCs的检测及收集。方法将超导电纳米碳材料科琴黑(Ketjen black,KB)应用于电化学生物传感器,并结合金纳米颗粒(Au nanoparticles,AuNPs)以修饰电极表面,使得电极表面可以结合大量的一抗用于特异性捕获CTCs。同时在钯-铱(Pd-Ir)纳米复合物中掺杂硼(B)、磷(P)元素,形成PdIrBP介孔纳米球(PdIrBPMNS),并利用其修饰二抗作为信号探针催化过氧化氢(H2O2)从而放大电化学输出信号,以此对CTCs进行定量检测。检测完成后采用抗体洗脱剂甘氨酸-盐酸(Gly-HCl)使CTCs从电极表面释放并回收,以用于进一步的临床研究。结果本次研究成功合成新型纳米材料PdIrBPMNS,AuNPs和KB,并利用透射电镜、扫描电镜、元素分析及原子力显微镜等分析方法对几种材料进行了表征。基于以上三种材料的电化学细胞传感器具有良好的稳定性和重复性。在最佳实验参数下,当细胞浓度在10-106cells/mL范围内时,电流信号与细胞浓度有良好的线性关系,检测限低至2 cells/mL。此外,甘氨酸盐酸(Gly-HCl)用作抗体洗脱剂,可从电极上充分释放CTCs并无损收集以用于进一步的临床研究。结论科琴黑和金纳米颗粒的引入可以有效增大电极的比表面积、提高电子传递能力;钯铱硼磷介孔纳米球能高效地催化过氧化氢从而放大电化学反应信号。这两个因素的存在有效地拓宽了该细胞传感器的检测范围,并使其最低检测限大大降低。除此之外,甘氨酸-盐酸的引入还可以实现细胞的无损回收。综上所述,本次构建的新型超灵敏电化学传感器在临床应用方面有较大的潜力,有利于对肿瘤患者的转移进行早期监测及预后判断。
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