斑马鱼胚胎发育过程中cyclin C基因母型和合子型表达的初步研究

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斑马鱼胚胎发育过程中cyclinC基因母型和合子型表达的初步研究目的:通过研究cyclinC基因在母型和合子型的表达研究,阐释其在中囊胚过渡时期的可能作用。方法:(1)通过体外受精的方式,获取数量较多的斑马鱼胚胎;(2)使用TRIzolReagent抽提胚胎的总RNA;(3)通过RT-PCR、5’/3’-RACE等方法,在斑马鱼中克隆出全长cyclinC基因,提交GeneBank,并分析基因序列,对不同物种的Cyclin C的基因同源性进行分析;(4)通过做Northern blot实验,来验证该基因的存在以及它的大小;(5)利用地高辛(DIG)标记的探针,做不同发育阶段斑马鱼胚胎的整体原位杂交实验,阐释cyclinC在时空层面的表达情况;(6)通过Dct基因来建立siRNA技术平台,为进一步研究cyclinC基因的功能作准备。结论:CyclinC基因在进化上,具有很高的保守性,是持家基因的一种;而且它既是母型表达又是合子型表达,在胚胎发育当中的作用有待进一步的研究。
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