目的:结直肠癌（CRC）患者对以奥沙利铂（Oxaliplatin,L-OHP）为主的化疗耐药是其生存率降低的主要原因,因此积极寻找耐药机制及探索新的治疗靶点相当重要。我们前期研究对结肠癌细胞实施全基因组敲除并在L-OHP筛选压力下,发现“线粒体核糖体蛋白L34（mitochondrial ribosomal proteins L34,MRPL34）”的缺失可能是L-OHP耐药的关键因素。本课题旨在研究MRPL34在结直肠癌奥沙利铂耐药中的作用及机制,为结直肠癌患者的奥沙利铂化疗耐药探寻新的治疗靶点。方法:1.利用TCGA数据库,分析MRPL34的表达水平与CRC患者生存期和预后的关系。2.利用CRISPR/Cas9技术将靶向敲除MRPL34基因的慢病毒感染CRC细胞建立MRPL34敲除的细胞株。同时建立MRPL34过表达的CRC细胞株。3.蛋白印迹法（Western Blot,WB）检测MRPL34蛋白的敲除,CCK-8、细胞集落形成实验检测L-OHP作用下的细胞活力。4.电感耦合等离子质谱（ICP-MS）检测在奥沙利铂作用下,MRPL34敲除组与对照组结直肠癌细胞内铂（Pt）的含量。5.蛋白质组学研究在奥沙利铂作用下MRPL34敲除组与对照组蛋白质富集差异情况。6.流式细胞仪检测MRPL34敲除组,对照组和过表达组CRC细胞在奥沙利铂作用下的凋亡情况。激光共聚焦显微镜观察MRPL34在CRC细胞中的定位及线粒体膜电位变化情况。Western blot检测线粒体促凋亡和抗凋亡蛋白的表达变化。结果:通过TCGA生信分析,发现结直肠癌组织与正常组织相比MRPL34表达减少,肿瘤组织中MRPL34高表达的患者总生存期（OS）延长。通过ICP-MS实验,确定在奥沙利铂作用下,对照组和敲除组的细胞内Pt含量没有差异,排除了MRPL34对药物转运载体的可能影响。敲除MRPL34消弱奥沙利铂对结直肠癌细胞的凋亡作用,同时促凋亡蛋白Bax和凋亡执行者Caspase-3、Caspase-9表达量下调。结论:MRPL34表达水平与结直肠癌恶性程度相关,可能作为结直肠癌预后判断的新标志物。MRPL34通过影响线粒体凋亡途径介导CRC细胞对奥沙利铂的敏感性。