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目的:生肌玉红提取液是中医外治经典理论“祛腐生肌”的代表方药,其临床应用较广泛,本论文拟通过对新西兰白兔术后开放性创面的愈合的相关指标的观察及创面血红素氧化酶1(HO-1)及转化生长因子B1(TGFβ1)的含量的测定,分析创面愈合情况与HO-1及TGFβ1的含量的相关性。
方法:24只新西兰白兔,雄性,实验采用自身平行对照,在每只新西兰白兔背部制造三个直径3CM大小,深达全层皮肤的背部机械性创面模型,随机分为生肌玉红提取液组,贝复济组(重组碱性成纤维细胞生长因子外用溶液),生理盐水组,分别在造模后的第3、5、7、10、14天取材,观察各组创面愈合时间,采用标准透明方格胶片测量创面愈合率,用MPIAS2500彩色病理图文分析系统检测创面修复组织内成纤维细胞数、用RT—PCR的方法检测H0-1、TGFβ1mRNA,用免疫组织化学方法检测HO-1、TGFβ1及增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达。
结果:
1.各组的创面愈合时间:生肌玉红提取液组较贝复济组愈合时间平均提前3天(P<0.05),较生理盐水组平均提前6天(P<0.05)。
2.各组创面愈合率:生肌玉红提取液组、贝复济组及生理盐水组的创面愈合率随时间推移均表现出上升趋势,在伤后5d,7d,10d,14d生肌玉红提取液组的创面愈合率显著高于贝复济组(P<0.05)和生理盐水组(P<0.05)。
3.各组的组织形态:生肌玉红提取液外用可以促进成纤维细胞的增殖,与贝复济组及生理盐水组比较,术后3d、5d、7d、10d成纤维细胞数量明显增加,结果有统计学差异(P<0.05)。
4.各组HO-1蛋白及mRNA的表达:生肌玉红提取液组创面HO-1蛋白及mRNA含量高于贝复济组及生理盐水组,结果有统计学差异(P<0.05)。
5.各组TGFβ1蛋白及mRNA的表达:生肌玉红提取液组创面TGFβ1蛋白及mRNA的含量高于贝复济组及生理盐水组,结果有统计学差异(P<0.05)。
6.各组PCNA的表达:PCNA免疫组化染色结果显示阳性细胞主要集中于近创缘组织、创面基底部、以及残留的皮脂腺等皮肤附属器和新生的肉芽组织和表皮细胞中,且首先主要表达在近创缘组织和皮肤基底层中。生肌玉红提取液组在各个时相点PCNA的染色深度比对照组更深、着色细胞数量明显比贝复济组及生理盐水组要多,结果有统计学差异(P<0.05)。
结论:生肌玉红提取液能够促进创面修复,其可能的作用机理是通过提高创面HO-1表达、TGFβ1表达,促进细胞增殖,增加成纤维细胞等创面修复细胞,减少创面愈合时间,促进愈合。