论文部分内容阅读
目的:寻找贵州省神经管畸形(neural tube defects，NTDs)高发的可疑危险因素（包括遗传、环境及营养等方面），探讨母亲己糖激酶Ⅱ基因(hexokinaseⅡ，HKⅡ)、人胰岛素受体基因(insulin receptor, INSR)、浆细胞膜糖蛋白(plasma cell membraneglycoprotein-1，PC-1)基因多态性及环境因素与子代NTDs之间的关系，并研究危险因素间是否存在交互作用及交互作用的大小，从而揭示多因素在NTDs发生中的作用。
方法:采用1∶1匹配的病例对照研究，选取2010年10月至2013年2月间在贵州省9个地区（州）的63所医院生育NTDs患儿或B超诊断为NTDs患儿而引产的母亲110例组成病例组，选取同期生育正常儿的母亲或与病例组妇女孕周相近的孕妇110名组成对照组。对两组研究对象进行问卷调查，采集每例研究对象肘静脉血5ml，提取DNA，-20℃保存备用;采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和PCR产物测序验证相关基因多态性的方法，对二组研究对象己糖激酶Ⅱ基因第15外显子C736G、INSR基因第8外显子6244位核苷酸G→A突变、PC-1基因第4外显子121位点K/Q多态性进行检测。数据分析运用SPSS16.O软件，采用Logistic回归模型，对HKⅡ、INSR、PC-1基因及其他调查因素进行单因素及多因素分析，筛选贵州省NTDs发生的影响因素。
结果:HKⅡ基因第15外显子在本次研究中仅发现1种基因型:NN（野生型），PCR产物测序结果与限制性酶切结果一致;经卡方检验两组间未见统计学差异。
INSR基因第8外显子6244位核苷酸G→A突变分为野生型N1N1和变异型N1N2、N2N2，PCR产物测序结果与限制性酶切结果一致。病例组基因型频率分布为30.0％、56.4％、13.6％，对照组为58.2％、38.2％、3.6％，经卡方检验两组间具有统计学差异(x2=20.12，P＜0.05);病例组等位基因A、T频率分布为58.2％、41.8％，对照组为77.3％、22.7％，经卡方检验两组间具有统计学差异(x2=18.34，P＜0.05)。
PC-1基因外显子4第121位点K/Q的基因频率在病例组和对照组的比较:PC-1基因121位点在本次研究中仅发现2种基因型—即野生型KK和杂合突变型KQ，未发现纯合突变型QQ; PCR产物测序结果与限制性酶切结果一致。其基因型频率(KK、KQ)在病例组的分布为81.8％和18.2％，在对照组的分布为90.0％和10.0％，经卡方检验两组间差异无统计学意义（x2=3.04，P＞0.05）;等位基因频率(K、Q)在病例组的分布为90.9％和9.1％，在对照组的分布为95.0％和5.0％，经卡方检验两组间差异无统计学意义(x2=2.81，P＞0.05)。
经单因素条件logistic回归分析将60项研究变量中有统计学差异的6项引入多因素条件logistic回归分析，最终进入模型的变量有5项，分别为文化程度、妊娠剧吐、食用发芽土豆、妊娠期糖尿病和INSR6244位核苷酸基因突变，OR及其95％CI分别为0.45(0.28～0.73)、3.62(1.46～8.95)、4.01(1.65～9.72)、3.65(1.41～9.48)、3.10(1.52～6.33)。
交互作用分析结果显示:母亲高文化程度与携带INSR N2的易感等位基因呈负交互作用，交互作用指数S=0.35＜1，交互作用归因比API=-0.53。INSR6244位核苷酸基因多态性与妊娠剧吐、食用发芽土豆和妊娠期糖尿病之间存在正交互作用，交互作用超额相对危险比RERI分别为6.08、3.80和2.74，交互作用指数S分别为4.27、3.73和2.29，交互作用归因比API分别为0.68、0.61和0.47。
结论:INSR6244位核苷酸基因多态性可能与NTDs的发生有关，HKⅡ基因第15外显子C736G、PC-1基因121位点突变未见与NTDs发生相关。母亲高文化程度是贵州省NTDs发生的独立保护因素，影响贵州省NTDs发生的主要危险因素为母亲妊娠剧吐史、食用发芽土豆和妊娠期糖尿病。