可口革囊星虫（Phascolosoma esculenta）富含胶原蛋白,是一种高蛋白低脂肪海产品,是生物活性肽的理想来源。胶原蛋白肽具有抗氧化、降血压、减缓衰老、抗菌、调节免疫力等功效,在食品、化妆品和医药领域应用广泛。本文从可口革囊星虫体壁中提取胶原蛋白,并通过响应面法优化胶原蛋白肽的酶解制备工艺;然后将酶解多肽经超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析分离纯化,以总抗氧化能力和超氧阴离子清除率为指标,筛选得到高抗氧化活性的多肽组分,并通过质谱技术鉴定其氨基酸序列,同时分析其温度、p H、金属离子、胃肠道消化稳定性;最后探究其对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用,以期为可口革嚢星虫资源的深度开发和合理利用提供方向。主要研究结果如下:（1）分析可口革囊星虫基本营养成分,并通过单因素试验结合响应面试验优化胶原抗氧化肽的酶解制备工艺。基本营养成分分析结果表明,可口革囊星虫体壁中粗蛋白含量为干基的78.5%,总糖和粗脂肪仅占干基的6.0%和5.7%。通过酸溶盐析法提取体壁胶原蛋白,以总抗氧化能力和超氧阴离子清除率为筛选指标,确定木瓜蛋白酶和中性蛋白酶同步酶解为最适酶解方案,在该酶解方案下,通过单因素试验结合响应面法优化得到胶原抗氧化肽的最适酶解条件为:料液比（g/m L）1:30、蛋白酶添加量8135 U/g、蛋白酶酶活比1:1、酶解温度51.6℃、酶解p H 6.4、酶解时间4.2 h。该条件下制备的胶原肽总抗氧化能力为1.33μmol/m L,超氧阴离子清除率为78.75%。（2）依次通过超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析对胶原肽进行分离纯化,并对得到的胶原抗氧化肽进行纯度、氨基酸序列和稳定性分析。最适酶解条件下制备的胶原肽经超滤分级得到F1（Mw＜3k Da）、F2（3 k Da＜Mw＜10 k Da）和F3（Mw＞10 k Da）三个多肽组分,抗氧化活性测定结果表明,当多肽浓度相同时,组分F1抗氧化活性最强,当F1浓度为6 mg/m L时,其总抗氧化能力为1.33μmol/m L,超氧阴离子清除率为76.15%,DPPH、ABTS自由基和羟自由基清除率分别为36.19%、46.25%和40.26%,均显著高于其它两个组分（p＜0.05）。将组分F1依次经Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephadex G-10凝胶过滤层析纯化,得到抗氧化活性最强的多肽组分F1b-1。反相高效液相色谱分析结果显示F1b-1为单一峰,表明该多肽组分为单一组分。通过LC-MS/MS对F1b-1的氨基酸序列进行鉴定,共得到匹配度较高的5条肽段,其氨基酸序列分别为AGDDAPRAVF、PSIV、LVAGGL、VVGIVA和GIPGAP。F1b-1的稳定性分析结果表明,温度对其抗氧化活性影响较小,但p H对其活性影响较大,F1b-1的抗氧化活性在酸性条件下能保持稳定,但在碱性条件下急剧下降,此外,0.25-2 mmol/L浓度的Mg2+、K+、Ca2+对其抗氧化活性无显著性影响（p＞0.05）,而Cu2+对活性有一定的提高作用,经体外模拟胃肠道消化后其抗氧化活性有所降低。（3）通过H2O2诱导HepG2细胞构建氧化损伤模型,探究胶原抗氧化肽F1b-1对细胞氧化损伤的保护作用。细胞毒性试验结果显示,F1b-1在浓度0-800μg/m L范围内对HepG2细胞无明显毒性和增殖作用。以细胞存活率为指标,通过H2O2诱导构建细胞氧化损伤模型,确定最佳造模条件为用400μmol/L H2O2刺激12 h,在此条件下细胞存活率为48.69%。与损伤模型组相比,经F1b-1预处理的HepG2细胞存活率显著提高。此外,F1b-1能提高细胞内GSH含量,增大SOD、CAT、GSH-PX酶活性,降低MDA含量,还可清除细胞内ROS,且在100-600μg/m L的浓度范围内具有浓度依赖性,表明F1b-1对H2O2诱导的细胞氧化损伤具有良好的保护作用。