目的：　　1.建立肾虚血瘀-子宫内膜容受性不良大鼠模型，为研究补肾活血中药对子宫内膜容受性的影响及其机理提供符合中医特征的病证结合的动物模型。　　2.从wnt7a、HOXA10方面深入系统探讨子宫内膜容受性的建立机制及补肾活血中药-益肾活血丸对子宫内膜容受性的作用及其机理，为该法在临床中的应用提供实验研究基础。　　方法：　　实验一：将80只雌性SD大鼠，随机分为5组，每组16只大鼠。行阴道涂片观察大鼠动情周期，自动情间期开始用药造模：模型组、模型+中药组大鼠给予羟基脲溶液450mg/kg·d灌胃，共10天，米非司酮组、米非+中药组、正常对照组大鼠给予等量生理盐水灌胃；造模的第4天模型组、模型+中药组开始加用肾上腺素0.3 mg/kg·d头颈部多点皮下注射，共7天，米非司酮组、米非+中药组、正常对照组大鼠给予等量生理盐水头颈部多点皮下注射。造模期间观察大鼠一般情况。造模结束后，每晚18:00雌性大鼠与雄性大鼠1:1合笼，次晨8：00发现阴栓或阴道涂片发现精虫者，确定为妊娠第1天。模型+中药、米非+中药组大鼠自妊娠第1天开始给予益肾活血丸溶液1.733g/kg·d灌胃，其余各组大鼠给予等量蒸馏水灌胃。于妊娠第3天上午9:00，米非司酮组、米非+中药组大鼠给予米非司酮溶液5mg/kg，头颈部多点皮下注射，共一次，其余各组给予等量的无水乙醇油溶剂头颈部多点皮下注射。于妊娠第5天上午9:00，每组随机抽取8只大鼠，10%水合氯醛麻醉后，抽取腹主动脉血检测血液流变学及血清 E2、P，透射电镜、扫描电镜下观察大鼠子宫内膜超微结构，各组剩余大鼠于妊娠第8天10%水合氯醛麻醉处死，计数孕鼠数及着床点数，计算着床率及平均着床点数。　　实验二：运用实验一保存的孕 D5大鼠子宫组织，采用实时定量 PCR、Western-blot、免疫组织化学技术检测子宫HOXA10、wnt7a的表达。　　结果：　　实验一:　　1.一般情况观察：正常对照组大鼠一般状态良好,毛色光滑,反应灵活,体重呈稳步增长,大便正常，舌质红润。与正常对照组比较，模型组大鼠出现拱背，蜷缩少动，反应较为迟钝，背部皮毛疏松不光亮、脱毛，大便偏稀，部分出现便溏，舌质紫黯等，大鼠体重、子宫湿重、子宫指数明显下降；米非司酮组子宫湿重、子宫指数明显下降，但对大鼠体重、反应状态等一般情况影响不明显。与模型组比较，模型+中药组大鼠体重、子宫湿重、子宫指数均明显增加，反应较前灵活，皮毛较前有光泽，脱毛现象好转，大便正常。与米非司酮组比较，米非+中药组大鼠子宫湿重、子宫指数明显增加，大鼠一般情况无明显变化。　　2.血液流变学：与正常对照组比较，模型组高、中、低切变率下全血粘度、聚集指数均明显升高，血浆粘度及变形指数无明显变化；米非司酮组低切变率下全血粘度明显升高，高、中切变率下全血粘度、血浆粘度及聚集指数均有升高趋势，但差异无统计学意义，变形指数无明显变化。与米非司酮组比较，模型组高、中、低切变率下全血粘度、聚集指数均明显升高，血浆粘度及变形指数无明显变化。与模型组比较，模型+中药组高、中、低切变率下全血粘度、聚集指数均明显下降，与米非司酮组比较，米非+中药组无明显变化。　　3. E2、P水平：与正常对照组比较，模型组、米非司酮组大鼠E2、P水平均明显下降；而模型组与米非司酮组比较，E2、P水平均无明显差异。模型+中药组大鼠与模型组比较、米非+中药组大鼠与米非司酮组比较，雌激素均有升高趋势，但差异无统计学意义，而孕激素均明显升高。各组之间P/E2值无明显差异。　　4.透射电镜观察子宫内膜超微结构：正常对照组及模型+中药组：子宫内膜上皮细胞核结构规则、体积大，核仁明显，线粒体丰富、体积较大，内质网丰富，粗面内质网周围附着丰富核糖体。模型组、米非司酮组：子宫内膜上皮细胞核不规则，部分有分叶，核内异染色质增多，核仁小或无核仁，线粒体数量减少，空泡化，内质网水肿扩张明显，大小不均，粗面内质网周围有脱颗粒现象。米非司酮+中药组：子宫内膜上皮细胞核体积小，核仁较少，线粒体体积较米非司酮组增大，增多，内质网轻微水肿，粗面内质网周围脱颗粒现象较米非司酮组好转。　　5.扫描电镜观察子宫内膜超微结构：正常对照组：子宫内膜上皮细胞突起，微绒毛几乎消失，表面见丰富的发育成熟胞饮突，分布均匀，大小一致，表面光滑。模型组及米非司酮组：子宫内膜表面覆以短而细的微绒毛，见少量发育中胞饮突，稀疏性分布，大小不一，发育不同步。米非+中药组子宫内膜表面覆以微绒毛，见少量发育中胞饮突，局灶性分布，发育不同步。模型+中药组：子宫内膜上皮细胞突起，有皱褶，微绒毛几乎消失，表面见丰富的发育成熟的胞饮突，部分融合成片状，表面光滑。　　6.平均着床胚泡数及着床率：平均着床点数：与正常对照组比较，模型组、米非司酮组均明显减少，而模型组与米非司酮组无明显差异。与模型组比较，模型+中药组平均着床点数明显增加，与米非司酮组比较，米非+中药组平均着床点数明显增加。着床率：与正常对照组比较，模型组、米非司酮组着床率均明显下降，而模型组与米非司酮组无明显差异。与模型组比较，模型+中药组着床率明显升高；与米非司酮组比较，米非+中药组着床率有增加趋势，但差异无统计学意义。模型+中药组、米非+中药组与正常对照组比较，均无显著性差异。　　实验二：　　实时定量PCR、western-blot、免疫组化三种方法检测结果一致：　　1. HOXA10的表达：与正常对照组比较，模型组、米非司酮组大鼠子宫内膜HOXA10表达均明显下降，而模型组与米非司酮组无明显差异。模型+中药组大鼠子宫内膜HOXA10表达较模型组明显增加。而米非+中药组大鼠子宫内膜HOXA10表达较米非司酮组有增加趋势，但差异无统计学意义。　　2. wnt7a的表达：与正常对照组比较，模型组、米非司酮组大鼠子宫内膜wnt7a表达均明显下降，而模型组与米非司酮组无明显差异。模型+中药组大鼠子宫内膜wnt7a表达较模型组明显增加。而米非+中药组大鼠子宫内膜wnt7a较米非司酮组有增加趋势，但差异无统计学意义。　　3. HOXA10与wnt7a的相关性分析：相关系数r>0.5,P<0.05.　　结论：　　1.运用羟基脲灌胃450 mg/kg·d，造模10天，第4天开始加用肾上腺素0.3 mg/kg·d皮下注射7天，可成功建立肾虚血瘀-子宫内膜容受性不良模型大鼠，该模型符合中医病证结合特征。　　2. E2、P可能参与了子宫内膜容受性的调节，E2、P水平下降可能导致子宫内膜容受性降低。　　3. wnt7a、HOXA10可能参与了子宫内膜容受性的建立，wnt7a、HOXA10表达降低可导致子宫内膜容受性下降，着床窗口期子宫wnt7a、HOXA10的表达可作为评价内膜容受性的指标。　　4. wnt7a可能通过调控下游靶基因 HOXA10的表达影响子宫内膜容受性，二者呈正相关性。　　5.益肾活血丸可能通过提高P、wnt7a、HOXA10表达，改善内膜超微结构，改善肾虚血瘀状态，提高子宫内膜容受性，从而促进胚胎着床。