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[目的]生长抑制因子1～5(Inhibitor of Growth1～5),即ING基因家族1～5。是多种肿瘤的抑制基因。通过多种机制参与了肿瘤细胞的生长、增殖、DNA修复、侵袭、迁移和凋亡等不同阶段的生物学过程。ING3作为家族基因里结构最特殊的一员,尚未报道在乳腺癌中的相关研究。本实验拟通过重组慢病毒侵染乳腺癌细胞株MCF-7和HCC1937,通过RT-PCR和Western Blot验证其转染效率,通过划痕、侵袭、迁移实验。探讨生长抑制因子3的表达对乳腺癌细胞生物学特性的影响。是否如ING3在多种肿瘤中一样起到抑制作用,为临床治疗乳腺癌提供新的基因靶点和思路。[方法]1、分别以10%的FBS混合DMEF-12和RPMI,培养乳腺癌细胞株MCF-7和 HCC1937。2、以ING3为作用靶点合成LV5-ING3和LV5-NC并进行慢病毒滴度检测。3、以LV5-ING3侵染乳腺癌细胞株MCF-7、HCC1937,同时以LV5-NC侵染对应细胞株作为阴性对照。4、72h时即完成荧光蛋白表达,并在荧光显微镜下观察慢病毒和乱序病毒的侵染效率。5、RT-PCR 验证 LV5-ING3 侵染后的 MCF-7 和 HCC1937 的 ING3 表达。6、通过Western Blot检测侵染ING3后的MCF-7和HCC1937中ING3蛋白的表达。7、通过细胞划痕实验来对比过表达ING3的乳腺癌细胞MCF-7、HCC1937与阴性对照细胞迁移能力的影响。8、通过侵袭和迁移实验来对比过表达ING3的乳腺癌细胞MCF-7、HCC1937与阴性对照细胞的迁移及侵袭能力的影响。[结果]1、RT-PCR监测显示LV5-ING3能提高乳腺癌细胞株MCF-7和HCC1937中ING3的表达水平(p<0.05)2、Western Blotting结果显示经LV5-ING3侵染乳腺癌细胞株MCF-7和HCC1937后,ING3蛋白表达增加(p<0.05)3、细胞划痕实验结果表明:经LV5-ING3侵染的MCF-7和HCC1937的细胞迁移速度明显减慢(P<0.05)。4、细胞侵袭和迁移实验表明:经LV5-ING3侵染的MCF-7和HCC1937的侵袭和迁移能力明显下降(p<0.05)。[结论]1、过表达ING3可明显抑制乳腺癌细胞株MCF-7、HCC1937的迁移和侵袭的能力。