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油菜黑胫病(Phoma stem canker or blackleg)是一种世界性的油菜真菌病害,有弱毒(Leptosphaeria biglobosa)和强毒(Leptosphaeria maculans)两种类型,每年都给世界油菜生产带来严重损失。我国最早于1999年从油菜秸秆中发现弱侵染型病原菌Leptosphaeria biglobosa。本研究对该病原菌进行了生物学特性及遗传多样性的研究。具体研究成果如下：1.从采自我国的油菜秸秆上共分离获得84株病原菌,鉴定结果显示,采集到的84株黑胫病病原菌全部为Leptosphaeria biglobosa。2.菌株的生物学特性为：该病原菌在5-35℃均可进行营养生长并产孢,最适生长和产孢温度为25℃；在pH4-10的范围内该菌均能生长并产孢,在pH7的条件下生长最快,产孢最多。光照处理对该菌营养生长无显著影响,但对孢子产生有抑制作用；最适的碳源、氮源分别是可溶性淀粉、牛肉膏。分生孢子的致死温度为52℃。3.建立了适合Leptosphaeria biglobosa ISSR分子标记的最佳反应体系,即在25μL反应体系中包含TaqDNA聚合酶1U,Mg2+2.0mmol/L,dNTPs0.2mmol/L,引物0.6gmol/L,模板40ng以及2.5μL10xbuffer。4.从110条引物中筛选出24条适于(Leptosphaeria biglobosa) ISSR-PCR扩增的引物,并确定了各引物的最佳退火温度。经对20株病原菌的稳定性检测,证实该优化体系可用于该病原菌遗传多样性的研究。5.利用筛选出的24条引物对国内外的99株病原菌进行ISSR-PCR反应,对扩增结果进行聚类分析。在遗传相似系数为0.65时,国内菌株与国外菌株分成两个居群,而且国内菌株基本按地理来源聚为一个类群。6.利用Popgene32软件分析国内六个省市菌株的居群结果表明：国内各省菌株遗传多样性差异较小,省际间相比较,江苏省菌株存在较大遗传多样性,顺序为江苏>湖北>安徽>内蒙古>上海>四川。与英国和加拿大菌株相比较,中国的菌株与英国菌株和加拿大菌株均有较高的遗传一致度。