目的 对冻干甲肝减毒活疫苗毒种与成品检定中的关键性项目的检定方法进行优化。（1）利用单克隆抗体代替常规的人、猴免疫血清进行毒种外源因子检查及鉴别试验。（2）利用Labworks凝胶成像分析系统判断疫苗RT-PCR滴度；建立病毒滴度检测的RT-PCR-ELISA法、微量免疫荧光法。（3）确定疫苗牛血清白蛋白残留量检测最佳方法。 方法 （1）毒种检定：将单克隆抗体与甲肝病毒进行中和试验，观察单克隆抗体的中和作用；利用单克隆抗体中和毒种，进行外源因子检查，并应用于鉴别试验。（2）感染性滴度检测：通过对RT-PCR反应液的离子浓度、PH值等条件的优化，建立检测滴度的RT-PCR一步法，利用Labworks凝胶成像分析系统的半定量功能判断结果，并与常规组织培养法比较；将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色，读取光密度值（OD值），判断结果，并与常规组织培养法比较；取适宜稀释度病毒接种细胞己成致密单层的96孔培养板，至增殖高峰时直接在板上固定细胞／病毒系统，用间接免疫荧光法观察结果，并与常规组织培养法比较。（3）牛血清白蛋白残留量测定：比较疫苗牛血清白蛋白残留量检测中反向间接血凝法、酶联免疫法的重复性、精确性。 结果 （1）此单克隆抗体可中和10⁵ CCID₅₀／ml甲肝病毒，将此高效价