目的:研究人脐静脉内皮细胞(HUVECs)转染AE2shRNA后在高糖诱导内皮细胞凋亡中的作用。方法:将人脐静脉内皮细胞株CRL-2480,均匀接种在六孔培养板上,随机分为四个组:未转染正常对照(Control)组、高糖(HG)组、转染非特异shRNA(阴性对照组,Non-silencing shRNA)组、转染AE2 shRNA(RNAi)组。除Control组外,其余各组在转染后,用含35.6mM葡萄糖的DMEM继续培养48h,然后检测以下指标:①细胞存活率;②HUVECs中AE2 mRNA的表达;③HUVECs中AE2蛋白的表达;④细胞凋亡的程度;⑤细胞内活性氧(ROS)的含量;⑥细胞中Caspase-3活性;⑦HUVECs中线粒体膜电位变化;⑧细胞内NO水平。结果:HUVECs用高糖培养48h后,细胞存活率明显下降,AE2 mRNA和蛋白表达水平升高,与Control组相比具有显著性差异(P<0.01);Caspase-3激活增多,ROS含量增加,NO水平和线粒体膜电位下降,细胞明显凋亡,与Control组比较具有显著性差异(P<0.05)。HUVECs先转入AE2 shRNA干扰质粒,再用高糖培养液培养48h后,细胞的存活率较单纯用高糖培养液培养的内皮细胞明显上升,AE2 mRNA和蛋白表达水平也相应地明显下降,与高糖组比较具有显著性差异(P<0.01);Caspase-3激活明显减少,NO下降不明显,ROS含量降低,线粒体膜电位升高,细胞凋亡明显减轻,与高糖组比较具有显著性差异(P<0.05)。而转入非特异shRNA用高糖培养液培养48h后,以上所对应的指标并没有发生显著性变化,与高糖组比较没有统计学差异(P>0.05)。以上结果表明实验成功地将AE2基因特异性沉默后,有效地降低了高糖所致ROS的生成,并且阻止了线粒体膜电位的下降及Caspase-3的激活,明显防止了高糖诱导内皮细胞的损伤和凋亡。结论:AE2可介导高糖诱导内皮细胞损伤或/和凋亡,其机制可能与ROS/mPTP/Caspase-3途径激活有关;AE2基因沉默对高糖诱导内皮细胞损伤或/和凋亡具有保护作用。