本论文将沉淀聚合法(precipitation polymerization)和可逆加成-断裂链转移活性自由基聚合法(Reversible Addition-Fragmentation Chain Transfer Radicalpolymerization，RAFT)相结合，制备了四环素分子印迹聚合物微球，并对其在牛奶样品分析中的应用进行了研究，然后探索在印迹微球表面接枝亲水限进层的反应条件。　　 分子印迹材料具有化学稳定性好、特异性识别性能高、亲和性好的优点，在固相提取方面显示了优越性。而RAFT活性自由基沉淀聚合法有利于得到粒径均一的微球，并可用于制备多功能材料。本论文以RAFT活性自由基沉淀聚合法制备了四环素分子印迹聚合物微球，将分子印迹聚合物微球用作固相萃取柱填料，对牛奶中的四环素物质进行富集，简化了样品的前处理过程，为四环素类物质的检测提供了一个简便、快捷、可靠地分析方法。　　 主要工作如下，　　 1.利用RAFT活性自由基沉淀聚合法制备了四环素分子印迹聚合物微球，并向反应体系中引入了大分子物质作致孔剂，研究了致孔剂用量、类型，单体和与引发剂比例等条件对印迹聚合物微球形貌、色谱性能和吸附量的影响。通过扫描电子显微镜、平衡吸附和尺寸排阻色谱法等手段对分子印迹聚合物微球的形貌、粒径、吸附性能和平均孔体积等性能进行表征，并以印迹聚合物微球作液相色谱固定相，测定其对四环素类物质保留能力、特异性识别能力和柱压等。实验结果表明，选择PEG-12000作为致孔剂，增加了填料孔体积，降低了柱压。制备的分子印迹聚合物微球对四环素类物质有较强保留能力和特异性识别性能，而且柱压比较低，可以较好地满足液相色谱分析要求。　　 2.以四环素分子印迹聚合物微球为固相萃取柱填料，用于牛奶中四环素类物质的富集和样品的净化，考察了流动相pH、流动相中缓冲溶液比例、浓度等条件变化时，分子印迹聚合物微球对四环素保留性能的变化趋势。然后在优化的色谱条件下，进行牛奶样品中四环素类物质的的分子印迹固相萃取-高效液相色谱在线测定。实验结果表明，四环素类物质在0.05-2μg/mL范围内线性关系良好，线性相关系数R2＞0.99，加标回收率均高于94.7％，RSD小于2.6％。　　 3.在合成四环素分子印记聚合物微球之后，利用微球表面的RAFT链转移基团，在分子印迹聚合物微球表面继续接枝亲水层，制备出一种外表面亲水、内表面疏水的新型限进材料。该材料可以实现对牛奶中蛋白质等大分子的排阻作用和对四环素类小分子物质的特异性结合功能。