人参皂甙逆转K562/A02细胞耐药性的实验研究

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目的 以人红白血病多药耐药细胞系K562/A02为研究对象,研究人参皂甙(TSPG)对K562/A02细胞耐药性的影响及其作用机制。方法 MTT法测定TSPG作用前后K562/A02细胞对DOX的药物敏感性变化,分析其耐药倍数和逆转倍数。应用免疫组化法检测TSPG作用前后K562/A02细胞mdr-1基因产物P-gp及bcl-2蛋白的表达。应用RT-PCR法检测TSPG作用前后K562/A02细胞mdr-1 mRNA表达情况。结果 (1)TSPG对K562/A02细胞增殖的直接抑制作用与浓度成正比,TSPG50μg/ml 、100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml时对K562/A02细胞增殖的抑制率分别为0、0.28%、2.83%、13.31%,本实验将低于200μg/ml的浓度视为无毒剂量。(2)TSPG在无毒剂量下能增强DOX对K562/A02细胞的毒性作用,K562/A02对照组、TSPG50μg/ml组、TSPG100μg/ml组、TSPG150μg/ml组的IC50值分别为5.980、4.138、3.248、1.281μg/ml,后三组逆转倍数分别依次为1.45、1.84、4.67,相对逆转效率分别依次为31.43%、46.63%、80.19%,提示TSPG逆转K562/A02细胞对DOX的耐药性与浓度正相关。K562/A02细胞对K562/S细胞的耐药倍数为49.83倍。(3)TSPG150μg/ml作用K562/A02细胞3天后P-gp表达阳性程度有所下降,有显著性差异(P<0.01)。(4)TSPG150μg/ml作用3天后K562/A02细胞bcl-2蛋白表达阳性程度变化无显著性差异(P>0.05)。(5)TSPG150μg/ml作用24小时K562/A02细胞mdr-1 mRNA表达降低,有显著性差异(P<0.01)。结论 <WP=5>(1)TSPG在无毒剂量下能部分逆转K562/A02细胞的耐药性,逆转效率与浓度正相关。(2)TSPG逆转K562/A02细胞耐药性的机制主要是下调mdr-1 mRNA的表达,导致其产物P-gp减少,从而使抗癌药物在细胞内蓄积增加,毒性增加。(3)TSPG逆转K562/A02细胞耐药性的机制与bcl-2蛋白表达变化无显著性相关。
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