人Parkin基因重组腺相关病毒载体的构建及鉴定

来源 :桂林医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rainbow_qu2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的为了了解、应用人Parkin基因在治疗帕金森病中所起的作用,利用腺病毒伴随病毒载体(AAV Helper - Free System)构建和表达人Parkin基因。方法于18周胎脑中提取黑质组织,并提取RNA,针对Parkin基因设计引物,反转录出目的基因,连接于T载体上进行测序,将正确的Parkin基因插入pAAV - IRES - hrGFP质粒,协同pAAV - RC质粒和pHelper质粒共转染HEK 293细胞,包装表达Parkin基因的重组腺病毒伴随病毒,初步检测病毒的感染效率。结果在包装细胞系HEK293细胞中能形成较高感染效率的腺病毒伴随病毒,激光共聚焦检测可发现HEK293细胞内有绿色荧光蛋白表达。结论成功构建重组质粒,将携带人Parkin基因的重组腺相关病毒载体可感染细胞,并在细胞内表达,可望在帕金森疾病治疗的领域开辟新的天地。
其他文献
目的:本课题通过对高血压合并持续性房颤组和单纯高血压组患者的血浆P-选择素(P-Selectin)及血管性血友病因子(vWF)的含量进行测定及比较,研究房颤患者血小板和内皮细胞功能
目的探讨线粒体与内质网应激在大鼠压疮发生中的作用机制,线粒体及内质网应激的作用及其介导凋亡的情况,进一步了解压疮的病理机制,为有效预防及治疗压疮提供新的靶点及依据
目的本文通过对青少年健康素养的现状及相关因素进行调查分析,了解青少年健康素养的水平,分析其影响因素,为进一步干预提供依据。方法1采用两阶段随机整群抽样方法:(1)在2014
研究背景:银屑病(Psoriasis,OMIM#177900)是一种表皮过度增殖的慢性炎症性皮肤病。银屑病的病因和发病机制尚未清楚,现在普遍认为银屑病是一种复杂疾病,涉及多个位点、多个基因及和环境因素的共同作用。寻常型银屑病(Psoriasis Vulgaris,PV)是最常见的临床类型。本课题组通过全基因组关联分析(Genome-wide Association Study,GWAS)研究在国际
一  小区里有很多老太婆。  比如一进大铁门,从小官的放哨亭朝后走十步,公用厕所斜对过,眼见的第一栋楼底下就闷坐着一长串老太婆。她们屁股底下那只船,那只不知谁扔下,也不知谁捡来的褪了色的破沙发,载着她们紧紧停靠在一楼阳台凹陷的空地上。夏天阴凉,冬天太阳斜斜地射进来,正好暖洋洋的。  老太婆们从早坐到晚上,谁都不动,也不说话。好像她们单凭自己是不存在的,只偶尔寄存于几个来去的相邻眼里。路过的人认出了
期刊