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黑花生内皮中含有丰富的花色苷色素,但是到目前为止,对黑花生衣色素的系统研究较少。本文以“黑玉珍”黑花生品种为原料,采用酸性水溶液热浸提的方法探索了黑花生衣色素的最佳提取条件。然后,采用大孔树脂对粗提液进行初步分离纯化,从七种大孔树脂中预选出四种吸附性能较好的树脂,进行了静态和动态吸附/解吸动力学实验研究。并采用HPLC-PDA-ESI-MS/MS分析方法对黑花生衣中所含花色苷种类和几种黄酮醇进行了结构鉴定。最后利用组合柱层析的方法制备出高纯度的黑花生衣花色苷组分和单体。主要研究内容和结果如下: 黑花生衣色素对热和pH稳定性研究发现,花色苷在高温和高pH环境下很不稳定。花色苷在水溶液中的稳定性要优于在乙醇溶液中。确定了黑花生果最佳脱皮条件为70℃烘干30min,并测得“黑玉珍”黑花生衣中花色苷总量为8.18mg/g干黑花生衣。料液比为1:50(m/v)对黑花生衣进行两级浸提,结果显示,黑花生衣色素的最佳提取条件为:酸性水溶液(pH2.0),浸提温度70℃,浸提时间20min,在此条件下提取率为7.95mg/g干黑花生衣。 从七种大孔树脂(AB-8、SP-207、LS-305A、LS-305、HP-20、LS-610B和DM-21)中筛选出四种(LS-610B、DM-21、LS-305和HP-20)进行静态和动态吸附/解吸试验。静态实验结果表明,四种树脂的吸附等温线与Langmuir模型能很好地拟合。拟二阶动力学模型和粒子内部扩散模型能很好地描述树脂的吸附过程。结合动态吸附和洗脱实验,确定DM-21树脂最适合工业化生产使用,以70%乙醇洗脱得到的黑花生衣花色苷产品纯度为5.74%,产率为14.5%(以黑花生衣干重计)。 采用UV-vis、HPLC-PDA/UV-vis和HPLC-PDA-ESI-MS/MS三种方法,从黑花生衣粗提液中鉴定出了7种主要成分,包括4种矢车菊素类花色苷,3种槲皮素类黄酮醇。其中矢车菊素-3-槐二糖苷和矢车菊素-3-接骨木二糖苷是黑花生衣中含量最多的两种花色苷组分。 采用组合柱层析的方法,将黑花生衣粗提液经过乙酸乙酯萃取,XAD-7HP大孔树脂初步层析,ODS介质二次层析,制备出三个不同的组分。确定组分Ⅱ和组分Ⅲ分别为矢车菊素-3-槐二糖苷和矢车菊素-3-接骨木二糖苷。再经过ODS-AQ层析制备,由HPLC-PDA(200~600nm)检测可知两种花色苷单体的纯度分别为97.57%和98.94%。组分Ⅰ为一些较强极性共聚物的混合物,经过Sephadex LH-20纯化以后得到了一个较纯的组分(保留时间在11min左右),峰面积百分比由组分Ⅰ粗品中的6.06%提高到85.31%。