柠条锦鸡儿CBF/DREB1基因的克隆及其过表达对提高拟南芥抗旱、抗冻能力的影响

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低温、干旱和盐害等非生物胁迫严重影响植物的生长、发育和作物产量。DREB转录因子,能够特异性地结合DRE元件上的核心序列A/GCCGAC,启动下游与抗逆相关的功能基因的表达来响应对低温、高盐、干旱等胁迫。基于DREB在信号途径中的重要地位,本论文以柠条锦鸡儿DREB1基因为研究对象,以拟南芥野生型、CkDREB1基因过表达转基因纯合体植物为材料,进行了初步分析,结果如下:(1)从柠条锦鸡儿中成功分离了三个版本的CkDREB1基因的全长DNA序列,开放阅读框全长均为615bp。CkDREB1蛋白AP2上游和下游有DREB1亚家族成员一般都有的PKK/RPAGRxKFxETRHP保守序列和DSAWR保守序列,序列的同源性比对分析结果表明CkDREB1蛋白属于DREB蛋白家族的A-1亚家族。(2)Northern分析表明CkDREB1基因受低温强烈诱导,对干旱和ABA也有一定的响应,但对高盐处理不响应。(3)RT-PCR和Northern检测表明CkDREB1基因过表达纯合体株系中CkDREB1均有不同程度的过表达。冷驯化后,CkDREB1基因过表达株系的抗冻能力比野生型提高;干旱胁迫下,CkDREB1基因过表达株系叶片的持水能力比野生型更强。
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