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本研究以广东信宜市林科所国家马尾松良种基地的混合家系成熟合子胚为外植体,对马尾松不定芽诱导、继代增殖、伸长和不定根诱导进行研究。并在此基础上,运用农杆菌介导马尾松RCA小同工型基因转化马尾松成熟合子胚进行遗传转化研究,以期提高马尾松光合生产力。主要研究结果如下:1.马尾松成熟种子的最佳灭菌方法为70%酒精消毒1min+0.1%升汞灭菌10min,成活率为90%。2.以马尾松成熟合子胚为外植体诱导不定芽的适宜培养基为DCR+1.0mg/L6-BA+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖+6.7g/L琼脂,pH=5.8,诱导出的不定芽生长健壮、翠绿,最高诱导率为78.54%。同时在培养基中添加10mg/LVc能有效抑制外植体褐化。3.马尾松不定芽增殖的合适培养基为DCR+0.5mg/L6-BA+0.2mg/LIBA+10mg/L Vc+30g/L蔗糖+6.7g/L琼脂,pH=5.8。增殖后的芽翠绿,生长健壮,增殖系数为12.74。4.马尾松不定芽伸长的适宜培养基为DCR+0.15mg/LIBA+30g/L蔗糖+10mg/LVc+6.7g/L琼脂,pH=5.8,最高不定芽高7.8cm,不定芽徒长,茎伸长方面显得不明显。5.马尾松诱导不定根的适宜培养基为1/2DCR+0.5mg/LIBA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+10mg/LVc+6.7g/L琼脂,pH=5.8,生根率为10.0%,生长良好,有利于移栽的成活。6.在遗传转化选择压和抑菌抗生素浓度的确定试验中,筛选标记基因为新霉素磷酸转移酶基因(NPTII),采用卡那霉素和头孢霉素作为筛选抗生素和抑菌抗生素。经过梯度对比试验,结果表明采用50mg/LKan、200mg/LCef作为筛选时的选择压和抑菌抗生素浓度。7.在马尾松成熟合子胚遗传转化体系研究中,分析了影响成熟合子胚转化率的几个因素(预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮浓度),结果显示预培养时间为3d,菌液浓度OD600=0.6,侵染时间20min,共培养时间为3d,AS浓度为100μM是获得抗性芽较好的转化条件。8.对未转基因的马尾松进行实时定量得知,RCA小同工型基因在嫩叶中表达最高,茎中次之,根中表达量最低。