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目的:糖尿病肾病(DN)是糖尿病最常见的微血管病变之一,其发生发展与肾脏局部血管生成相关因子异常表达密切相关。目前临床上对DN尚缺乏有效的防治方法,而干细胞移植治疗可能是新的手段,现有相关研究多集中在间充质干细胞(MSCs),其中人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)报道较少,对糖尿病肾脏血管生成相关因子的影响也罕见报道。本研究旨在通过1型糖尿病肾病大鼠模型,实施hAMSCs移植治疗,评估糖尿病大鼠肾脏病变及其血管生成相关调控因子的变化,探讨hAMSCs对糖尿病大鼠肾脏微血管病变的影响。方法:取足月剖宫产胎盘羊膜,胰酶-胶原酶联合消化法分离hAMSCs。采用链脲佐菌素(STZ,55mg/Kg)腹腔注射构建大鼠糖尿病肾病模型,72只大鼠被随机分为正常对照组(NC组,n=24)、糖尿病肾病组(DN组,n=24)、hAMSCs移植组(MSC组,n=24)。MSC组大鼠成模后分别于第3周及第4周经阴茎静脉移植hAMSCs。于第6周、8周及12周末处死大鼠,收集血、尿、肾脏及胰岛标本,观察各组血糖、尿素、肌酐、24h尿蛋白、尿肾损伤因子1(KIM-1)、肾脏和胰岛病理的变化。通过免疫荧光检测MAB1281来评估hAMSCs在肾脏定植;采用免疫组化、免疫荧光及RT-PCR检测肾组织VEGF、TSP-1、Ang-1、Ang-2、Tie-2蛋白或mRNA表达。结果:(1)各时间点DN组和MSC组血糖、血尿素、肌酐、血胱抑素C、24h尿蛋白水平、KIM-1均不同程度高于NC组,其中MSC组血糖水平低于同时点DN组,但仅于12W时存在统计学差异(P<0.05);MSC组6?12周时尿素水平均低于同时点DN组(P<0.05),但两组各时点血肌酐、血胱抑素C水平无明显差异(P>0.05);MSC组24h尿蛋白水平均低于同时点DN组,但仅12周时存在显著统计学差异(P<0.05),MSC组6周、8周时KIM-1水平也明显低于DN组(P<0.05),但12周时却高于DN组(P<0.05);(2)组织病理显示DN组和MSC组胰岛结构不同程度破坏,胰岛边缘炎性细胞浸润;肾重指数明显增加,肾小管基底膜不同程度地增厚、系膜基质变多、小管间质炎症细胞浸润增多等病理变化,其中MSC组胰岛、肾脏病理改变相对减轻;(3)MSC组各时间点肾组织均发现MAB1281免疫荧光阳性表达,而DN组及NC组未找到;(4)免疫组化及荧光结果显示各时间点DN组、MSC组肾组织TSP-1、VEGF、Ang-1、和Tie-2表达较NC组均明显上调(P<0.05),其中MSC组TSP-1表达低于同时点DN组(P<0.05),VEGF及Ang-1表达虽高于同时点DN组,但VEGF表达仅于第6周时和第8周时存在明显统计学差异(P<0.05),Ang-1表达仅于第8周时存在明显统计学差异(P<0.05),而Tie-2表达于第6周时和第8周时高于、第12周时低于DN组(P<0.05);(5)RT-PCR结果显示各时间点DN组、MSC组肾组织TSP-1、VEGF、Ang-1?Ang-2以及Tie-2 mRNA的表达均较NC组不同程度上调,其中MSC组TSP-1表达水平均低于同时点DN组,尤8周时存在显著统计学差异(P<0.05),VEGF mRNA表达在12周时低于DN组(P<0.05);Ang-1 mRNA表达高于同时点DN组,但仅12周时存在明显统计学差异(P<0.05);而Ang-2、Tie-2mRNA的表达则与DN组无明显统计学差异(P<0.05);(6)相关性分析显示24h尿蛋白、KIM-1及TSP-1彼此呈正相关,Ang-1、VEGF、Tie-2彼此呈正相关;24h尿蛋白与VEGF、Tie-2、Ang-1呈负相关;TSP-1与VEGF、Tie-2、Ang-1呈负相关;KIM-1与尿素呈正相关,与Tie-2呈负相关。结论:(1)hAMSCs移植有助降低STZ诱导的1型糖尿病大鼠血糖水平;(2)hAMSCs可改善STZ诱导的1型糖尿病肾脏微血管病变,其机制可能与改善糖尿病大鼠肾脏血管生成相关因子异常表达,以及降低血糖相关。