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食管癌是全球第六大致命性癌症,并且其发病率仍在逐年升高。中国的食管癌病例约是全球总病例数的一半,中国是世界上食管癌的高发地区。虽然近期食管癌的诊断与治疗方面都有了最新的进展,但其预后生存率仍较低,同时其发病机制也尚不清楚,病理生物学原理仍未被完全了解。为降低食管癌的致死率,寻找新的治疗方法,研究食管癌的分子机理,探究新的有效治疗靶标拥有其重要意义。microRNAs(miRNAs)是一种非编码RNA单链小分子,可与目的基因的3’UTR或者5’UTR通过碱基互补配对的方式进行结合,调节靶基因的转录、翻译进而参与到多个生理和病理过程。大量的研究结果指出,在众多癌症中表达异常的miRNAs既可抑制癌症也可成为促癌因子。这些结论表明,miRNAs可能是癌症临床治疗新的潜在靶点。AKT信号通路在细胞存活、增殖、凋亡过程中发挥着重要作用,涉及到细胞代谢、生长、分裂、凋亡等多个过程,调节多个相互关联的细胞信号传导机制。NF-κB信号通路在癌症的发展过程中扮演着重要角色,其可以调控细胞增殖、细胞凋亡和血管生成等多个细胞生理过程。JNK是MAPK信号通路的另一亚类,其信号通路可调节多种疾病的生理和病理过程。因此AKT、NF-κB、JNK三条信号通路作为癌症治疗的靶点具有重要的研究价值。本研究中,我们用人食管癌细胞系KYSE150进行了功能性研究,在细胞表型实验中,利用RTCA测定细胞的增殖活力,结果表明过量表达miRNA-149-3p能够抑制食管癌细胞的增殖;通过Annexin-V-FITC/PI双染法,发现miRNA-149-3p能够促进食管癌细胞的凋亡。在分子机理层面,利用实时定量PCR测定炎症相关基因的表达水平,结果表明miRNA-149-3p 可抑制 IL-6、CCL-2、COX-2 基因表达;同时 miRNA-149-3p可以抑制由肿瘤坏死因子TNF-α诱导的炎症基因表达。利用Western blot测定方法,我们发现miRNA-149-3p可抑制食管癌细胞中AKT蛋白磷酸化。在此基础上,我们发现miRNA-149-3p可抑制食管癌细胞内AKT信号通路上游基因PDK1、TRAF6、TLR4、BCR、CDC37的表达。除此以外,利用Western blot检测,我们发现miRNA-149-3p可抑制食管癌细胞中JNK蛋白磷酸化和IκBα蛋白磷酸化。综上所述,miRNA-149-3p被证明在细胞水平上对食管癌具有负调节作用。该结论为将来食管癌的预防、治疗以及相关特异性药物的研发提供了新的靶点和思路。