肾小管上皮细胞损伤在肾小管-间质纤维化(RTIF)的发生发展中起重要作用。损伤的上皮细胞可发生死亡、脱落，致肾小管萎缩、功能丧失，进而促进肾小管-间质纤维化；还可通过分泌多种炎症介质和生长因子到间质内，参与间质炎症、纤维化进程；损伤的上皮细胞尚可通过转分化为肌成纤维细胞直接参与RTIF形成。而RTIF是肾脏病进展至终末期肾衰竭的主要原因和共同病理过程。
　　线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所，通过呼吸作用为生命活动提供必不可少的能量，此外，线粒体还具有调节细胞分化、参与信息传递、调控细胞周期和细胞凋亡等作用。肾小管上皮细胞富含线粒体，许多研究表明，线粒体结构和功能受损是肾小管上皮细胞损伤的重要标志之一。
　　钙调磷酸酶结合蛋白1(Cabin1)是一种多功能大分子蛋白，定位于肾小管上皮细胞中，其N端存在p53结合位点，可对p53蛋白表达起调控作用。同时，研究表明：p53是介导细胞线粒体损伤的关键因子，而Cabin1是否通过p53参与肾小管上皮细胞线粒体损伤的调节目前尚未见文献报道。再者，沉默信息调节因子1(SIRT1)是一种去乙酰化酶，可作为桥梁参与Cabin1对p53的调节。
　　基于上述背景，本课题旨在研究Cabin1蛋白与肾小管上皮细胞线粒体损伤的关系，进一步探究其是否通过SIRT1/p53通路调控上皮细胞线粒体损伤，进而参与上皮细胞损伤的调节，以期为肾小管-间质纤维化的研究提供新靶点和新思路。
　　一、动物实验
　　目的：观察5/6肾切除大鼠肾小管上皮细胞线粒体损伤与肾组织Cabin1蛋白表达变化，探究两者之间的关系。
　　方法：雄性SD大鼠18只，体重在200~250g之间，随机分为假手术组(n=6)和5/6肾切除组(n=12)，肾切除组进一步分为术后4周组(n=6)和术后8周组(n=6)。假手术组大鼠于术后8周检杀，肾切除组大鼠分别于造模后4和8周检杀，检杀前留取血、尿标本行24h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮检测；取肾组织行Masson染色病理检查，并行肾小管-间质损伤评分(TILS)；电镜观察肾小管上皮细胞线粒体形态结构改变；WB检测肾组织中Cabin1蛋白表达。
　　结果：随造模时间延长，大鼠24h尿蛋白、血肌酐、尿素氮均呈进行性升高。同时，肾小管上皮细胞形状变扁平，刷状缘缺失，最终发生细胞死亡、脱落等现象，肾间质炎症细胞浸润及纤维化表现呈进行性加重，TILS评分也逐渐升高。肾切除组大鼠肾小管上皮细胞线粒体肿胀、形状不规则，线粒体膜、线粒体嵴结构模糊甚至消失。肾组织中Cabin1蛋白表达也随造模时间延长呈进行性升高。
　　小结：Cabin1在肾小管上皮细胞损伤时表达升高，且其升高程度与线粒体损伤、上皮细胞损伤、肾小管-间质纤维化程度具有一致性。
　　二、细胞实验
　　目的：探究Cabin1在肾小管上皮细胞线粒体损伤中的作用及机制。
　　方法：采用10-6mol/LAngⅡ刺激体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞系(NRK-52E)，按刺激时间长短进一步分为0h组、24h组、48h组，不同时间点提取细胞，免疫荧光观察细胞中Cabin1蛋白表达和细胞骨架F-actin的变化，电镜观察NRK-52E细胞线粒体形态结构改变，WB检测细胞中Cabin1、SIRT1、p53、Cyto-C蛋白表达。继而，采用siRNA敲低NRK-52E细胞中Cabin1蛋白表达，电镜观察细胞线粒体形态结构变化，WB检测上述相关蛋白表达情况。最后，先敲低细胞中Cabin1表达，再予AngⅡ刺激细胞48h，同样以电镜观察细胞线粒体形态结构变化，WB检测相关蛋白表达情况。
　　结果：使用AngⅡ刺激细胞，可致：①NRK-52E细胞骨架F-actin破坏；②线粒体形态结构损伤；③上皮细胞中Cabin1、p53、Cyto-C蛋白表达上调，而SIRT1蛋白表达下调。采用siRNA敲低细胞中Cabin1的表达，可致：①线粒体形态结构损伤；②SIRT1蛋白表达下调，而p53、Cyto-C蛋白表达上调。先敲低细胞中Cabin1表达，再以AngⅡ刺激细胞，同单纯使用AngⅡ刺激相比，可致：①线粒体形态结构损伤进一步加重；②SIRT1蛋白表达进一步下调，而p53、Cyto-C蛋白表达则进一步上调。
　　小结：(1)在肾小管上皮细胞中，敲低Cabin1蛋白表达可引起线粒体结构和功能受损；(2)敲低细胞中Cabin1表达，可引起SIRT1表达下调，进而引起p53高表达，最终诱导上皮细胞线粒体损伤。
　　结论：Cabin1是调控肾小管上皮细胞线粒体损伤的关键分子，并可经SIRT1/p53通路抑制上皮细胞线粒体损伤。