论文部分内容阅读
利用ISSR和ITS分子标记技术，对分布于国内外的13种五针松的亲缘关系进行研究，研究结果表明： 1．利用12个随机引物对12种五针松的亲缘关系进行了ISSR分析，共检测到117个位点，多态位点百分率在9.40％～33.33％之间，多态位点百分率最高的是俄罗斯偃松(P．pumila)33.33％，最低的是柔枝松(P．flexilis)9.40％。 2．利用Shannon指数与Nei指数估算12种五针松的遗传变异，五针松的Nei指数(~*H)的变化范围在0.0346～0.1306之间，Shannon指数(~*I)的变化范围在0.0518～0.1910之间，两个指数均表明：遗传变异最高的是俄罗斯偃松，最低的是柔枝松。 3．根据Nei法计算12种五针松的基因多样性(Ht)为26.21％，其中种内基因多样性(Hs)为7.66％，种间基因多样性(Dst)为18.55％，五针松种间变异占总变异的70.78％，种间遗传变异水平较高。 4．利用ISSR分子标记构建的12种五针松的遗传关系聚类图，在阈值0.358处将12种五针松分为2个类群，第一类群包括乔松、华山松、海南五针松、华南五针松、美国白松、山白松、云南五针松；第二类群包括俄罗斯偃松、大兴安岭偃松、美国白皮松、红松、西伯利亚红松、柔枝松。 5．利用rDNA的ITS序列对13种五针松的亲缘关系进一步进行分析，得到13种五针松ITS序列全长为3kb，其中5.8SrDNA长度为161～163bp，种间相差2bp；ITS-2序列长度为236～245bp。经测序得到的13种五针松ITS-1的部分序列、5.8S和ITS-2全部序列作为一个共同数据距阵进行分析，构建了13个树种的系统发育树。 6．将本研究得到的13种五针松与从NCBI数据库中调取的其它7种五针松ITS序列一起分析，构建了20个树种的五针松系统发育树。