[目的]　　 肺癌是严重危害人类健康的疾病。干扰素（Interferon，IFN）作为目前研究最多、唯一具有抗病毒和抗肿瘤双重作用的生物反应调节剂，越来越受到重视。干扰素（IFN）在肿瘤的发生、发展、凋亡中起着十分重要的作用，但α-干扰素（IFN-α）对肺癌细胞的作用及其具体机制尚未十分明确。已经明确共刺激分子B7分子家族在肿瘤的增殖和凋亡中具有一定的作用，B7-H4（又称B7sl和B7x）是B7家族中的最新发现的一个新成员，目前认为B7-H4能通过抑制T细胞的增殖、细胞因子（如IL-2、4、10、IFN-γ等）分泌和细胞周期的进程来负性调控T细胞的免疫应答，提高肿瘤组织对T细胞攻击的抵抗力，从而使肿瘤细胞最终能逃逸机体的免疫监视，但其在细胞内相关信号通路及调控因素尚待深入研究。本实验中，我们拟通过体外细胞培养的方法来探讨IFN-α对人肺腺癌细胞系A549增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力以及凋亡水平的影响，旨在探讨α-干扰素对肺腺痛的抗癌作用，同时研究IFN-α对肺腺癌细胞B7-H4分子表达的影响，为今后进一步研究B7-H4表达调控因素，抑制B7-H4的表达对非小细胞肺癌的生物学行为和刺激特异性免疫反应的影响，进而研究B7-H4在细胞内相关信号通路，为肿瘤免疫干预提供新的思路。　　 [材料和方法]　　 1.应用MTT法检测IFN-α对人肺腺癌A549细胞处理前后细胞增殖活性；观察并比较IFN-α对细胞增殖活性的影响。　　 2.应用平板克隆形成实验检测IFN-α对人肺腺癌A549细胞处理前后细胞克隆形成能力；观察并比较IFN-α对细胞克隆形成能力的影响。　　 3.应用Transwell小室实验检测IFN-α对人肺腺癌A549细胞处理前后细胞迁移能力和侵袭能力；观察并比较IFN-α对细胞迁移能力和侵袭能力的影响。　　 4.应用流式细胞仪检测IFN-α对人肺腺癌A549细胞处理前后细胞凋亡水平；观察并比较IFN-α对细胞凋亡水平的影响。　　 5.应用RT-PCR技术检测IFN-α对人肺腺癌A549细胞处理前后细胞B7-H4 mRNA表达；观察并比较IFN-α对细胞B7-H4 mRNA表达的影响。　　 6.应用Western-blot技术检测IFN-α对人肺腺癌A549细胞处理前后细胞B7-H4蛋白表达；观察并比较IFN-α对细胞B7-H4蛋白表达的影响。　　 [结果]　　 1.MTT结果显示：IFN-α处理A549细胞后，同一时间随着浓度的增加或者同一种浓度随着时间的延长，细胞增殖能力逐渐降低。提示IFN-α可呈时间和浓度依赖性地抑制A549细胞的增殖能力（P<0.05）。　　 2.平板克隆形成实验检测结果显示：IFN-α处理A549细胞后，细胞克隆形成能力均不同程度地降低。随着药物浓度的增加，A549细胞克隆形成能力逐渐降低。提示IFN-α可呈浓度依赖性地抑制A549细胞克隆形成能力（P<0.05）。　　 3.Transwell小室实验检测结果显示：IFN-α处理A549细胞后，穿过基底膜的细胞数均不同程度地降低。随着药物浓度的增加，A549细胞迁移和侵袭能力逐渐降低。提示IFN-α可呈浓度依赖性地抑制A549细胞迁移和侵袭能力（P<0.05）。　　 4.细胞凋亡水平检测结果显示：IFN-α处理A549细胞后，细胞的凋亡水平均不同程度地升高。随着药物浓度的增加，A549细胞凋亡水平逐渐升高。提示IFN-α可呈浓度依赖性地促进细胞凋亡（P<0.05）。　　 5.RT-PCR技术检测结果显示：IFN-α处理A549细胞后，A549细胞B7-H4 mRNA表达与β-actin条带灰度比值均不同程度地升高。随着药物浓度的增加，A549细胞B7-H4 mRNA表达与β-actin条带灰度比值逐渐升高，A549细胞B7-H4 mRNA表达水平逐渐升高。提示IFN-α可呈浓度依赖性地增加细胞B7-H4 mRNA表达（P<0.05）。　　 6.Western-blot技术检测结果显示：IFN-α处理A549细胞后，A549细胞B7-H4蛋白表达与α-tubulin条带灰度比值均不同程度地升高。随着药物浓度的增加，A549细胞B7-H4蛋白表达与α-tubulin条带灰度比值逐渐升高，A549细胞B7-H4蛋白表达水平逐渐升高。提示IFN-α可呈浓度依赖性地增加细胞B7-H4蛋白表达（P<0.05）。　　 [结论]　　 1.IFN-α可呈浓度依赖性地降低人肺腺癌A549细胞的增殖水平、克隆形成、迁移和侵袭能力，诱导细胞的凋亡。　　 2.IFN-α可呈浓度依赖性地增强人肺腺癌A549细胞B7-H4 mRNA和蛋白水平的表达。