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目的:探讨阿帕替尼联合不同剂量白蛋白紫杉醇在卵巢癌耐药细胞系和异种移植瘤模型中的抗肿瘤作用以及所引起的不良反应。方法:1.白蛋白紫杉醇与阿帕替尼单药在SKOV-3/DDP中的作用以卵巢癌SKOV-3/DDP细胞为研究对象,分为3组进行研究,a):对照组,无药物干预;b):nab-P组,白蛋白紫杉醇40μmol/l;c):AP组,阿帕替尼50μmol/l(药量由MTT实验测得),利用Western blot及细胞免疫荧光检测SKOV-3/DDP的凋亡相关蛋白(BCL-2、Bax)、血管生成相关蛋白(p-VEGFR-2)、侵袭相关蛋白(MMP-2)的表达情况;Transwell实验观察药物对SKOV-3/DDP的侵袭和迁移力的影响。2.白蛋白紫杉醇联合阿帕替尼在SKOV-3/DDP中的作用建立不同剂量的白蛋白紫杉醇联合阿帕替尼的实验分组,a):对照组,无药物干预;b):联合用药组-1,白蛋白紫杉醇5μmol/l+阿帕替尼10μmol/l,c):联合用药组-2,白蛋白紫杉醇4.5μmol/l+阿帕替尼10μmol/l,d):联合用药组-3,白蛋白紫杉醇4μmol/l+阿帕替尼10μmol/l,联合使用指数用Compusyn软件分析,Western blot,免疫荧光,Transwell实验检测联合用药的效果。3.白蛋白紫杉醇联合阿帕替尼在异种移植瘤模型中的作用使用异种移植瘤模型来验证动物实验的结果与细胞实验是否具有一致性。将构建好的BALB/c卵巢癌裸鼠模型随机分成4组,a):对照组,无药物干预;b):白蛋白紫杉醇20mg/kg+阿帕替尼150mg/kg;c):白蛋白紫杉醇18mg/kg+阿帕替尼150mg/kg;d):白蛋白紫杉醇16mg/kg+阿帕替尼150mg/kg。分析肿瘤生长曲线,Western blot、免疫荧光和免疫组织化学法检测Bax、BCL-2、CD31、p-VEGFR-2、MMP-2的表达,分析药物的作用,并通过记录平均每日进食量及一小时活动力来评判药物所引起的副作用。结果:1.白蛋白紫杉醇与阿帕替尼单药在SKOV-3/DDP中的作用白蛋白紫杉醇和阿帕替尼对SKOV-3/DDP的IC-50值分别为45.53±4.06μmol/l(24h)、20.88±2.99μmol/l(48h)、8.77±0.64μmol/l(72h)和65.74±8.33μmol/l(24h)、50.66±4.96μmol/l(48h)、39.547±6.62μmol/l(72h)。Western blot检测蛋白的表达,白蛋白紫杉醇组及阿帕替尼组的相对灰度值分别为0.13±0.07,0.14±0.09(Bax)、0.09±0.01,0.09±0.01(BCL-2)、0.13±0.8,0.04±0.01(p-VEGFR-2)、0.04±0.01,0.05±0.01(MMP-2)。免疫荧光检测细胞阳性率,分别为13.87%±1.91,14.17%±1.69(Bax)、0.09%±0.01,0.09%±0.01(BCL-2)、25.81%±2.33,7.4%±0.88(p-VEGFR-2)、10.4%±0.85,10.83%±1.92(MMP-2),Transwell实验检测24h侵袭平均细胞数,分别为41±7.6,53±4.7。实验组的结果与对照组相比,其差异存在统计学意义(P<0.01)。2.白蛋白紫杉醇联合阿帕替尼在SKOV-3/DDP中的作用白蛋白紫杉醇与阿帕替尼对SKOV-3/DDP的联合抑制指数CL<1,联合用药组-1,组-2及组-3的Western blot相对灰度值分别为0.15±0.01,0.14±0.01,0.14±0.01(Bax)、0.06±0.01,0.06±0.01,0.06±0.01(BCL-2)、0.03±0.00,0.04±0.00,0.04±0.00(p-VEGFR-2)、0.03±0.00,0.04±0.00,0.04±0.00(MMP-2),免疫荧光示细胞阳性率分别为23.07%±1.13,21.57%±0.67,21.8%±1.8(Bax)、7.57%±1.11,7.4%±1.1,8.2%±1.2(BCL-2)、6.8%±1.51,7.5%±0.94,8.4%±0.88(p-VEGFR-2)、7.97%±1.2,9.83%±1.01,11.13%±0.4(MMP-2)。Transwell平均侵袭细胞数分别为6,12,14。联合用药组与对照组的结果相比,其差异均存在着统计学意义(P<0.01),而联合用药组间结果无明显差异。3.白蛋白紫杉醇联合阿帕替尼在异种移植瘤模型中的作用对照组,联合用药组-1,组-2以及组-3在进行药物干预后其平均瘤块体积分别为1452.83±61.47mm3,144±37.65mm3,142.33±31.4mm3和138.83±31.43mm3,实验组与对照组的结果相比,其差异均与对照组存在统计学意义(P<0.01),Western blot分析检测的相关蛋白的相对灰度值,组-1,组-2,组-3结果分别为0.18±0.12,0.17±0.17,0.17±0.02(Bax)、0.07±0.01,0.09±0.01,0.09±0.01(BCL-2)、0.16±0.02,0.16±0.04,0.2±0.01(CD31)、0.16±0.03,0.18±0.01,0.19±0.01(p-VEGFR-2)、0.29±0.03,0.3±0.02,0.29±0.01(MMP-2),免疫荧光组织蛋白阳性率分别为20.97%±2.09,19.13%±2.78,19.73%±1.52(Bax)、3.23%±1.35,2.43%±0.79,2.57%±0.5(BCL-2)、6.73%±1.47,9.53%±1.6,9.7%±1.96(CD31)、3.0%±0.29,3.83%±0.61,4.07%±1.04(p-VEGFR-2)、2.77%±0.54,2.87%±0.49,2.93%±0.69(MMP-2),免疫组织化学组织阳性率为34.17%±1.11,32.83%±0.95,32.77%±1.16(Bax)、13.33%±1.59,14.63%±1.48,13.87%±1.89(BCL-2)、11.63%±1.2,12.67%±1.52,12.33%±2.24(CD31)、17.1%±1.31,17.53%±1.68,18.23%±1.25(p-VEGFR-2)、14.53%±1.17,15.27%±0.74,15.57%±2.75(MMP-2),联合用药组其相关蛋白表达的结果与对照组结果相比,差异均存在统计学意义(P<0.01),而组间无明显差异。结论:1.白蛋白紫杉醇和阿帕替尼可以在耐药性卵巢癌细胞中发挥抑瘤作用;2.阿帕替尼联合白蛋白紫杉醇在耐药性卵巢癌细胞中可以发挥协同作用,提高单药的作用效果;3.在联合阿帕替尼后,白蛋白紫杉醇的干预剂量可以适当减少,以达到减缓机体不良反应的目的。