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肝癌细胞的侵袭转移特性在体外二维培养中表现为细胞频发形变,粘附不稳定,迁移速率增快和迁移方向频繁改变。整合素和MLCK是肿瘤细胞侵袭转移过程中调节细胞粘附稳定性和为细胞迁移提供驱动力的两个重要分子。从整合素和MLCK对细胞粘附及运动的影响,研究肿瘤细胞侵袭转移机制有重要的理论意义。目的通过对肝癌细胞整合素受—配体表达不平衡对其粘附特性的影响和MLCK抑制剂ML-7对肝癌细胞增殖和迁移运动的影响,探索肝癌细胞侵袭转移的过程机制。方法运用细胞形态学观察,图像分析软件,微管吸吮和流式细胞仪等手段,分别对肝癌细胞,正常肝细胞整合素表达水平及其配体纤维连接蛋白(Fibronectin,Fn)裱衬后的肝癌细胞的运动变形能力及粘附力进行检测和定量分析。通过细胞同步化,免疫荧光和免疫组化等实验技术对MLCK抑制剂ML-7作用前后肝癌细胞增殖,细胞骨架变化及细胞运动能力进行检测和定量分析。结果肝癌细胞的整合素表达量高于正常肝细胞;Fn可下调整合素的过表达;补充适当浓度胞外配体Fn(2.3μg/ml)可使胞外受配体比例恢复到正常肝细胞的整合素表达水平,肝癌细胞的粘附力增强,细胞运动能力减弱;随着MLCK抑制剂,ML-7浓度的增加,肝癌细胞增殖受到抑制,细胞由不规则的多边形趋向圆形;MLCK表达减弱,并由细胞膜周边向胞内转移;骨架解聚,应力纤维松弛,细胞迁移速率降低。结论胞外配体Fn对肝癌细胞整合素过表达有下调作用,肝癌细胞的受—配体比例是影响其粘附和运动的因素之一,细胞形变和骨架去装配与MLCK活性抑制程度相关;低浓度(6μM)的ML-7可在不破坏细胞骨架的前提下显著抑制细胞增殖和迁移。