在昆虫的繁衍进程中,鳞翅目两性昆虫间往往通过性信息素的精巧识别来实现其交配行为的调控—即新羽化的处女雌虫释放在空气中的性信息素分子,可被远距离的同种雄虫敏锐而准确地感受到。雄虫对这种性信息素的识别与其触角感受器淋巴液中大量的信息素结合蛋白(pheromone-binding proteins,PBPs)密切相关,而PBPs又属于气味结合蛋白(odorant-bindingproteins,OBPs)家族。作为茶园中主要的鳞翅目害虫,茶尺蠖(Ectropis obliqua Prout)幼虫严重影响了茶叶的产量和品质。为了深入研究茶尺蠖雌雄蛾之间的信息素感受机制,以及雄蛾对茶树挥发物的嗅觉感受机理,本文以茶尺蠖雄虫触角高丰度表达的PBP2、OBP9和OBP11为研究对象,通过生化和分子生物学技术深入研究其生理功能,在此基础上深入解析了 PBP2感受茶尺蠖两种主要Type Ⅱ性信息素成分(Z,Z)-3,9-6,7-环氧十八碳二烯(Z3Z9-6,7-epo-18:Hy)和(Z,Z,Z)-3,6,9-十八碳三烯(Z3Z6Z9-18:Hy)的物理化学机制。本研究不仅为其它昆虫感受Type Ⅱ性信息素的机理研究提供了理论依据,而且也有助于对生态系统中多元信息素成分互作提供了新的思路。研究结果如下:1.成功克隆了EoblPBP2和EoblOBP9、11三个基因的全长cDNA序列,并分析其氨基酸序列,蛋白的理化性质、二级和三级结构以及同源性。发现三者均符合OBPs的基本特征,包括蛋白大小,酸碱性以及含有6个Cys等。进化树分析中发现EoblPBP2属于PBP蛋白家族,EoblOBP9和EoblOBP11属OBP蛋白家族。2.Western Blot鉴定了EoblPBP2和EoblOBP9、11三种蛋白在茶尺蠖雄虫触角中专一表达,免疫荧光定位证实EbblPBP2在茶尺蠖雄虫触角长毛型感器中,同时也分布在鳞片上。3.通过荧光竞争结合实验分析EblPBP2和EblOBP9、11与两种Type Ⅱ性信息素成分以及多种茶树挥发物的结合特性,发现这3种蛋白均能识别Z3Z9-6,7-epo-18:Hy和Z3Z6Z9-18:Hy,但是EoblPBP2主要功能是识别性信息素,EbblOBP9主要功能是识别茶树挥发物,而EoblOBP11是两者兼顾不分主次。4.通过多重荧光光谱、紫外吸收光谱、圆二色谱、热力学分析、分子对接和点突变等技术阐明了 EoblPBP2与Type Ⅱ性信息素成分相互作用过程中,主要性信息素成分Z3Z9-6,7-epo-18:Hy更容易受到pH的调控相比于Z3Z6Z9-18:Hy,而且Z3Z6Z9-18:Hy更容易受到温度和氨基酸突变的影响。5.EoblPBP2可以识别吡虫啉,但是不受pH值变化影响,并且在亚致死剂量吡虫啉存在下,加强了EoblPBP2对两种Type II性信息素成分的结合能力。