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2012年在福建省一些真姬菇生产企业发生了一种国内未见的新病害。该病害的症状表现首先在子实体菌柄基部表面长出蛛网状的菌丝,并逐渐沿菌柄向菌盖蔓延。随着病情发展,病原菌菌丝体渐呈棉絮状,同时产生大量孢子,覆盖整个子实体,子实体逐渐萎蔫,死亡腐烂。该病害在一些菇场发生严重、传播迅速,已造成了重大的损失。然而,对于该病害的研究很少,病害发生的原因、传播途径还不清楚,给该病害的防治工作带来了极大的困难。本课题针对该病害进行了病原菌的分离与回接验证、病原菌的鉴定、病原菌的生物学特性、发病条件、致病机制和病害防治方法研究,结果如下:1.采用组织分离法和单孢分离技术分离得到该病害的病原菌纯培养物,编号H.a0001。根据科赫法则的原理,采用喷洒法将病菌孢子回接到健康真姬菇子实体上,进行正常的出菇管理,回接后15天左右即可观察到和自然条件下发病相似的症状,并从中重新分离到了与H.a000 1相同的纯培养物,初步判断H.a000 1为此病害的病原菌。从形态学和分子生物学两个方面进行该病菌的鉴定,得知该病菌为金黄菌寄生菌Hypomyces aurantius(Pers.)Fuckel(无性型:Cladobotryum varium Nees),从而确定该病害为蛛网病。2.对金黄菌寄生菌进行了生物学特性研究,结果显示,金黄菌寄生菌的菌丝体生长的温度范围为5~30℃,最适生长温度为20℃,pH范围是4.5~10.0,最适生长pH为5.5,在酸性条件下的菌丝生长速度比在碱性条件下的快,最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨,该菌在7%NaCl的高盐环境中无法生存,光照对菌丝体生长有一定的抑制作用。对其产孢特性研究结果显示该菌在PDA培养基中产孢量最大,在Czapek、PMA、PSA上逐渐减少,最佳产孢碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。对孢子的特性研究结果显示,在金黄菌寄生菌的孢子萌发过程中有较强的促进作用的碳源为蔗糖、葡萄糖和甘氨酸、蛋白胨,酸性条件下孢子更容易萌发,50℃处理40 min和55℃处理10 min以上以及紫外处理15 min以上都能使孢子失去活性,该菌孢子在有媒介保护的条件下能够抵御自然条件的胁迫,具有较强的抗逆性。3.在实验条件下模拟生产情况进行病情研究,结果显示蛛网病虽是子实体病害,但对真姬菇菌丝也有伤害,在真姬菇生长发育的各个阶段都能进行侵染。菌丝发育阶段侵染的孢子浓度对病害发生情况有所影响,当极少量孢子侵入时会导致产量降低而不发生子实体上的病害,当一定量孢子侵入时不仅产量降低且发生子实体病害,而当大量孢子侵入时将无法出菇。该病害在高湿环境下极易发生,高温有利于病菌孢子的萌发并侵入,而低温环境却更容易发病。该病害菌还可危害金针菇、杏鲍菇、秀珍菇等,具有较为广泛的寄主范围。4.从菌丝体和子实体两方面对该病害的致病原因进行了初步探究,通过对峙试验、双重培养试验、抑制试验来研究金黄菌寄生菌对真姬菇菌丝的危害作用,结果显示金黄菌寄生菌在菌丝生长过程中会产生某种挥发性物质来抑制真姬菇菌丝的生长,其代谢产物中含有某种物质危害真姬菇菌丝,使其裂解、破碎。对其发酵液进行初步提纯并进行活性检测,结果发现提取到的粗毒素具有一定的致病力。对于其中活性成分的具体分类有待进一步的研究。5.我们也对金黄菌寄生菌的防治进行了一定的研究,首先,选用9种常用的杀菌剂分别对金黄菌寄生菌菌丝、分生孢子和真姬菇菌丝进行毒力测定,结果显示供试9种杀菌剂对金黄菌寄生菌菌丝、分生孢子和真姬菇菌丝均有一定程度的抑制作用,且不同杀菌剂对金黄菌寄生菌和真姬菇菌丝的毒力存在显著差异。其中,咯菌腈表现最好,对金黄菌寄生菌有较强的抑制作用而对真姬菇菌丝的抑制作用相对较小,其次是异菌脲和百菌清,它们对金黄菌寄生菌的毒力比对真姬菇菌丝的毒力相对较高,而嘧菌酯、咪鲜胺锰盐、多菌灵、代森锰锌、嘧霉胺、甲基托布津对金黄菌寄生菌的毒力不比其对真姬菇菌丝的毒力大。其次,对比枯草芽孢杆菌、链霉菌Js-1T、哈茨木霉Tri.sp49和绿色木霉Tri.sp53发酵液单独使用和混合使用对真姬菇蛛网病病原菌和真姬菇菌株的抑菌效果,发现链霉菌Js-1T发酵液对蛛网病病原真菌具有较强的抑制作用,同时对真姬菇菌丝的抑制作用较小;此外,还发现芽孢杆菌发酵液和木霉发酵液配合使用对蛛网病病原真菌的抑制率有了明显的提高,表明这是一种十分具有潜力的生物防治新方法。