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牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)是目前公认的慢性牙周炎的主要致病菌之一,研究发现不同P.gingivalis菌株的致病性存在广泛差异,基因的遗传异质性是细菌毒力和致病性差异的物质基础。菌毛是P.gingivalis黏附宿主组织的主要结构,有广泛的生物学活性,根据菌毛fimA基因开放阅读框架(open reading frame,ORF)核苷酸序列的差异,fimA基因分6型(Ⅰ~Ⅴ和Ⅰb型)。国内外流行病学调查结果显示,ⅡfimA型和ⅣfimA型P.gingivalis与日本人及中国牙周炎的发生发展显著相关,ⅠfimA型P.gingivalis与健康的牙周状态相关,提示不同fimA型P.gingivalis的致病能力可能不同,故fimA基因型有望成为筛选P.gingivalis毒力克隆株的候选基因,因次寻找P.gingivalis高毒力克隆株,探讨其致病机理,对牙周病的防治具有重要指导意义本研究采用ELISA方法从蛋白水平比较不同fimA型P.gingivalis刺激PMN表达牙周组织破坏性酶MMP-8、MMP-9的差异,从而进一步探讨不同fimA型P.gingivalis致病性差异的原因。方法本研究主要采用等密度沉降分离法分离人外周血的PMN,使其与临床分离鉴定纯化的不同fimA型P.gingivalis菌悬液作用5min、30min、1h、2h分别收集其反应上清液,然后用ELISA方法检测其中MMP-8、MMP-9的含量。结果:1、本实验选择的P.gingivalis标准菌株ATCC33277(ⅠfimA)、W83(ⅣfimA)以及课题组分离鉴定纯化的ⅡfimA、ⅢfimA、ⅣfimA型P.gingivalis刺激PMN产生MMP-8、MMP-9的能力都显著高于空白对照组,证明不同fimA型P.gingivalis刺激PMN产生牙周组织破坏性酶是其致病能力的一方面。2、P.gingivalis模式株W83(ⅣfimA)与临床分离菌株ⅡfimA型P.gingivalis刺激PMN分泌MMP-8在速度及量上均高于其他细菌;临床分离株ⅢfimA型P.gingivalis是所有细菌中刺激PMN分泌MMP-8最弱的细菌。提示:P.gingivalis标准株W83(ⅣfimA)、临床分离菌株ⅡfimA型P.gingivalis对PMN产生破坏性酶MMP-8方面强于P.gingivalis标准株ATCC33277(ⅠfimA)及临床分离菌株ⅢfimA、ⅣfimA型P.gingivalis。3、P.gingivalis标准株ATCC33277(ⅠfimA)、模式株W83(ⅣfimA)以及临床分离菌株ⅡfimA刺激PMN分泌MMP-9能力高于临床分离菌株ⅢfimA、ⅣfimA型P.gingivalis。提示:临床分离菌株ⅡfimA型P.gingivalis在刺激PMN产生MMP-9方面强于其他临床菌株,而与标准菌株ATCC33277(ⅠfimA)、W83(ⅣfimA)之间比较尚没有差异。结论:临床分离菌株ⅡfimA型P.gingivalis在刺激PMN产生MMP-8、MMP-9方面强于临床分离菌株ⅢfimA、ⅣfimA型P.gingivalis,临床株与标准株细菌之间可能存在致病能力方面的差异,需要进一步进行相应fimA型P.gingivalis的标准株和临床株之间致病能力的比较。