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纳米结构脂质载体(NLCs)是一种新型抗肿瘤纳米载药体系,具有生物相容性好、载药量高、稳定性良好且易于药物释放等特点,引起了专家学者的广泛关注。紫杉醇(PTXL)是有丝分裂时期纺锤体的抑制剂,能够干扰微管解聚;吉西他滨(GEM)在细胞周期的GO/G1期、S期干扰DNA合成。二者对于治疗非小细胞肺癌(NSCLC)显示出了互相独立的治疗机制和互不重叠的毒性作用,因此GEM联合PTXL是极为有效的抗癌药物组合。本文设计合成了两种GEM/PTXL双药纳米结构脂质载体,并对其体、内外抗肿瘤活性进行研究。一、精密比例控制的GEM/PTXL双药靶向纳米结构脂质载体目前,组合给药的主要困难是无法准确控制精度,合理控制精度可以使联合作用的效果最优化。本文旨在精确控制亲水性GEM和疏水性PTXIL的比例,首先将两种药物通过可水解的酯键共价预共轭,形成药物共轭物poly(6-O-methacryloyl-D-galactopyranose)-GEM/PTXL(PMAGP-GEM/PTXL),之后采用纳米载体进行包载。同时,在NAG-NLCs的制备过程中加入葡萄糖受体的靶向性配体—N-乙酰-D-氨基葡萄糖(NAG),使NLCs对癌细胞具有主动靶向性。采用溶剂乳化挥发法制备的NAG-NLCs呈球形,平均粒径为120.3±1.3nm,多分散性指数为0.233±0.04,对两种药物均显示精密比例的控制。细胞毒性实验表明,NAG-NLCs对非小细胞肺癌细胞具有较好的抗肿瘤活性。并且,本研究从几种摩尔比例中挑选了两种药物的最佳摩尔比例,显现出了最佳的细胞毒性和组合效应。相比于游离药物组合和单独的纳米载药结合物而言,PMAGP-GEM/PTXIL NAG-NLCs(3:1)具有更好的协同作用。流式细胞术和激光共聚焦结果显示,A549细胞可以借助葡萄糖受体介导的内吞作用提高对NAG-NLCs的摄取效率。该联合给药系统解决了亲水性和疏水性药物组合在肿瘤靶向联合治疗中的应用问题,有助于实现NSCLC的最佳抗癌效果。二、环境响应型的GEM/PTXL双药靶向纳米结构脂质载体GEM联合PTXL治疗NSCLC的效果优于其中任何一者单独用药,且PTXL先于GEM的给药顺序,抗肿瘤效果最佳。本文通过制备环境响应型的NLCs,期望加快PTXL的释放速度,进而提高GEM和PTXL的协同作用。首先以PMAGP作为大分子聚合物,利用可以实现pH敏感的丁二酸酐接枝GEM,可以实现pH敏感和氧化还原双敏感的二硫代二丙酸接枝PTXIL,最终合成出PTXL-ss-poly(6-O-2-methacryloyl-d-galactopyranose)-GEM(PTXL-ss-PMAGP-GEM)。采用溶剂乳化挥发法制备PTXL-ss-PMAGP-GEM/NAGNLCs,并且在制备过程中加入两亲性嵌段共聚物 NAG-poly(styrene-alt-maleic anhydride)58-b-polystyrene130(NAG-P(St-alt-MA)58-b-PSt130)作为靶向材料。纳米粒理化性质结果表明,PTXIL-ss-PMAGP-GEM/NAG NLCs的粒径均一,包封率高。体外释药实验结果证实,PTXIL的释放速度快于GEM,且具有细胞内pH控制和GSH触发的释放特征。体内外靶向性实验结果表明,PTXL-ss-PMAGP-GEM/NAGNLCs具有主动靶向作用。体外细胞毒性和体内抗肿瘤实验结果表明,PTXIL-ss-PMAGP-GEJM/NAG NLCs具有显著的抗肿瘤和最佳的协同作用效果。本研究为非小细胞肺癌靶向治疗提供了一种有效的联合给药方式。