肉质是畜禽生产的重要经济性状,其中一个重要的影响因素就是肌纤维。肌纤维类型与肉质的关系十分密切,其中慢肌纤维比例高的肌肉肉质更好,它是在很多基因控制下的产物。钙调磷酸酶(calcineurin,CaN)是一种常见的细胞信号分子,它参与的CaN/NFAT信号通路可以影响肌纤维类型,尤其是对促进慢肌纤维的转变有重要的作用。研究发现钙调磷酸酶肌小节结合蛋白基因家族(MYOZs)可以通过改calcineurin的活性来影响肌纤维类型的转变,从而影响畜禽的肉质。为了探究天府肉羊MYOZ2基因和MYOZ3基因在肌纤维转化方面的作用,本试验利用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)、分子克隆、实时荧光定量(RT-qPCR)以及蛋白免疫印迹法(western blotting)等实验技术对MYOZ2基因和MYOZ3基因进行了初步的研究,结果如下：1.本研究成功获得天府肉羊MYOZ2基因和MYOZ3基因的cDNA全部编码序列,MYOZ2基因序列长856bp,包含一个长度为795bp的ORF框,编码264个氨基酸；MYOZ3基因序列长为832bp,含有一个大小为735bp的ORF框,编码244个氨基酸。将其提交至NCBI,获得两个基因的登录,分别是JX573191和KC537058。2.核酸序列和氨基酸序列比对发现MYOZ2基因较MYOZ3基因更加保守；系统进化分析发现,MYOZ2和MYOZ3与绵羊的亲缘关系最近,与爪蟾的亲缘关系最远。3.蛋白性质和结构分析发现MYOZ2蛋白和MYOZ3蛋白都含有若干个磷酸化位点,都是亲水蛋白,不含跨膜结构、信号肽序列以及糖基化位点,而且它们具有相同的Calsarcin保守结构域,二级结构上都包含α-螺旋、无规卷曲及延伸片断三种形式,且以前两者为主。4.利用实时荧光定量PCR技术检测了MYOZ2基因和MYOZ3基因在300日龄8个不同组织中的相对表达量。结果显示MYOZ2基因在天府肉羊的腹直肌和心肌中有较高水平的表达,股二头肌和背最长肌的表达量较低,而肝脏、脾脏、肺和肾脏的表达量极其微少；MYOZ3基因在腹直肌中表达量最高,股二头肌、肾脏、肺、背最长肌和脾脏中的表达量也较高,心肌和肝脏中几乎没有表达。在不同的日龄的4种不同肌肉组织中,MYOZ2基因和MYOZ3基因的表达量变化波动各不相同。5.使用蛋白免疫印迹方法检测天府肉羊MYOZ2蛋白和MYOZ3蛋白在300日龄8个不同组织中的表达情况。结果显示：MYOZ2蛋白和MYOZ3蛋白只在心肌、股二头肌、腹直肌和背最长肌中检测到表达,而内脏组织中没有检测到表达,并且它们在股二头肌中表达量明显高于其他组织,但是MYOZ2蛋白在背最长肌中表达最低,而MYOZ3蛋白则是在心肌中表达最低；不同生长阶段的背最长肌和比目鱼肌中都检测到MYOZ2蛋白和MYOZ3蛋白的表达,但是表达的变化趋势各不相同。