【摘 要】
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背景心包液(Pericardial fluid,PF)是存在于浆膜心包脏层壁层之间的一种清亮浆液,心包液通过润滑心外膜表面来减少心包内部的摩擦,具有润滑作用。心包液是否存在细胞成分迄今并未见报道。目的了解大鼠和兔心包液内的细胞成分及其分化潜能,为心包液细胞基础研究和临床应用提供形态学依据。方法1.无菌条件下分别抽取大鼠和兔心包液,Ficoll法分离后离心培养。取不同培养代次细胞,倒置显微镜观察细胞
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背景心包液(Pericardial fluid,PF)是存在于浆膜心包脏层壁层之间的一种清亮浆液,心包液通过润滑心外膜表面来减少心包内部的摩擦,具有润滑作用。心包液是否存在细胞成分迄今并未见报道。目的了解大鼠和兔心包液内的细胞成分及其分化潜能,为心包液细胞基础研究和临床应用提供形态学依据。方法1.无菌条件下分别抽取大鼠和兔心包液,Ficoll法分离后离心培养。取不同培养代次细胞,倒置显微镜观察细胞形态特征。2.利用免疫荧光技术分别对大鼠和兔心包液细胞进行免疫显色,观察心包液细胞的表面标记CD44、CD45、Vimentin、Sca-1、nanog的表达情况。以PBS代替一抗作为阴性对照。3.取第3代大鼠和兔心包液细胞分别进行成骨、成脂诱导,另对大鼠心包液细胞进行成心肌诱导。以完全培养基培养的细胞作为对照。4.提取兔心包液细胞总RNA,反转录合成cDNA,采用实时定量PCR技术及检测其中CD44、CD45、Vimentin的表达,采用荧光定量PCR技术CD44、Vimentin基因表达量的差异,以GAPDH作为内参对照。结果1.大鼠和兔心包液中含有形态较为均匀、生长状态良好、增殖能力强的细胞群,细胞形态多呈多角形或长梭形,大鼠较兔心包液细胞形态更为细长,成旋涡状生长,而兔心包液细胞多成内皮样生长方式。2.免疫荧光结果显示,兔心包液细胞有CD44、Vimentin的阳性表达,不表达CD45。PCR结果显示Vimentin表达量明显多于CD44表达量(P<0.05)大鼠心包液有CD29、Sca-1、CD44、Vimentin的阳性表达,不表达CD45、nanog。3.成脂和成骨诱导后,大鼠和兔的心包液细胞可向骨细胞和脂肪细胞分化。成心肌诱导后,大鼠心包液细胞有向心肌分化的潜能。结论大鼠和兔心包液中含有多项分化潜能的细胞,可向成骨、成脂、成心肌分化。它们可能对心脏或者心包修复具有积极意义。
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